녹용중에 존재하는 지질 및 Gangliosides에 관한 연구

Abstract

본 연구에서는 녹용중에 존재하는 당지질 성분을 조사하였다. Folch-Suzuki 분배법에 의해 수용액 층으로 분배된 당지질 성분을 Sephadex G-50 column chromatography 와 DEAE-Sephadex A-25 column chromatography로 정제하였다. 녹용의 당지질들을 HPTLC에서 전개시킨 후 band 1(녹용에 존재하는 당지질중 주요성분)을 chloroform/methanol/water (30:60:8, v/v/v)용액으로 추출하여 HPLC로 분석한 결과, 4개의 peak로 분리되었다. 그 중 가장 많은 양(48.5%)으로 존재하며, 3.17분 대에서 용출되는 부분만을 모아 positive-ion FAB-MS로 분석한 결과 미지물질은 분자량이 1065이고, 1065-784-541-392의 분자구조를 가지는 것으로 확인할 수 있었다. 보다 정확한 구조를 분석하기 위해서 NMR과 FT-IR을 이용하였다. 2D-COSY NMR에 의하여 281 fragement (1065-784)는 oleate일 것으로 추측해 볼 수 있었으며, ^(13)C NMR과 FT-IR의 결과, 이 물질내에는 10개 정도의 산소와 결합된 탄소와 2-3개의 이중결합이 존재함을 알 수 있었다. 한편, 녹용중에 존재하는 ganglioside 성분을 조사하였다. Sephadex G-50 column chromatography 와 투석으로 정제된 당지질로부터, 용매추출법을 이용하여 ganglioside 성분만을 분리하였다. DEAE-Sephadex A-25 column chromatography와 HPTLC, capillary eletrophoresis 로 결과를 확인하였으며, 녹용의 70% 에탄올 추출액에는 GM3와 아직 그 구조가 확인되지 않은 band 2가 주요 ganglioside로 존재하며, 녹용의 70% 에탄올-chloroform/methanol(2:1, v/v)-chloroform/methanol (1:2, v/v) 추출액에는 band 3와 band 4가 주요 ganglioside로 존재함을 알 수 있었다.; The major component of glycolipids in antler was investigated. Glycolipids, extracted in aqueous phase by Folch partitioning, were purified on Sephadex G-50 column and DEAE-Sephadex A-25 column. The major component prepared from HPTLC plate was injected on HPLC column and four peaks were separated. The fractions of major peak(3.17 min) were pooled and analyzed by positive-ion FAB-MS. As a result, it was identified that the molecular weight of major component was 1065 and structural fragments were 1065-784-541-392. Further structural analyses were performed with M, FT-IR spectroscopy. 281 fragment(1065-784) was estimated as a oleate by 2D-COSY NMR. It was suggested by ^(13)C NMR and FT-IR that approximately 10 of hydroxyl or oxygen-linked carbons, and 2-3 of double bonds were existed in unknown compound. The gangliosides in antler were also investgated. After Sephadex G-50 column chromatography and dialysis, gangliosides and neutral glycolipids in antler were extracted by several organic solvents. Then, DEAE-sephadex A-25 column chromatography was performed to isolate gangliosides. The result was detected by HPTLC and capillary electrophoresis, and it showed that 70% ethanol extracts of antler contained GM3, band 2 as major ganglioside and 70% ethanol - chloroform/methanol( 2: 1, v/v) - chlorofod/methanol (1 : 2. v/v) extracts of antler contained band 3, band 4 and some other gangliosides.