Rat hepatic microsomal cytochrome P-450 apoprotein에 對한 Vitamin類의 영향에 關한 影響 에 關한 硏究

Abstract

The effects of vitamin A, vitamin C, vitamin E, β-naphthoflavone, and cobaltous chloride on hepatic microsomal cytochrome P-450 in rats were investigated. The result is as follows. 1. When administrated with vitamin A, vitamin C, vitamin E, and cobaltous chloride in rats, the content of total microsomal cytochrome P-450 was decreased. In contrast, administrated β-naphthoflavone alone was increased. 2. As results by means of SDS-polyacrylamide gel electrophoresis on hepatic microsomal cytochrome P-450 apoprotein, cytochrome P-450 apoprotein is divided into 4 bands. The administration of vitamin A, vitamin C, vitamin E, and cobaltous chloride make the bands almost decreased, especially band Ⅲ, Ⅳ in contrast with the control group.;간조직 microsome에는 mixed function oxidase 또는 monooxygenase라고 불리우는 중요한 산화효소군이 존재한다. 그리고 이들은 많은 물질의 대사과정에서 전자전달체로 작용하며 이들 호소군체는 cyctochrome P-450이라는 중요한 성분이 함유되어 있다. 그러므로 각종 간질환이 있을 때는 cytochrome P-450을 포함하는 이 효소계의 활성이 저하되고, 각종 약물, 스테로이드 화합물, 지방산 및 발암물질 등에 대한 대사장애를 동반하게 된다. 본 실험에서는 체중 150g 내외의 웅성흰쥐(wistar strain)를 사용하여 vitamin A, vitamin C 및 vitamin E를 각각 투여한 군, β-naphthoflavone, β-naphthoflavone과 vitamin A, β-naphthoflavone과 vitamin C 및 β-naphthoflavone과 vitamine E를 각각 함께 투여한 군, cobaltous chloride, cobaltous chloride와 vitamin A, cobaltous chloride와 vitamin C 및 cobaltous chloride와 vitamin E를 각각 함께 투여한 군에서 간조직 microsome 내 mixed function oxidase system의 terminal oxidase인 cytochrome P-450의 함량을 Omura와 Sato 방법에 의하여 측정하였고, 각 실험군에 따른 microsomal fraction은 Laemmli방법에 따라 polyacrylamide vertical slab gel에서 전기영동하였으며 다음과 같은 결론을 얻었다. Vitamin A, vitamin C 및 vitamin E를 각각 투여하였을 때 hepatic microsomal cytochrome P-450의 함량이 대조군에 비하여 모두 감소되었다. β-Naphthoflavone 만 투여하였을 때 hepatic microsomal cytochrome P-450의 함량이 대조군에 비하여 증가되었으며, β-naphthoflavone과 vitamin A, β-naphthoflavone과 vitamin C 및 β-naphthoflavone과 vitamin E를 각각 함께 투여하였을 때는 β-naphthoflavone만 투여한 군에 비하여 모두 감소되었다. 또한 cobaltous chloride만 투여하였을 때 hepatic microsomal cytochrome P-450의 함량이 대조군에 비하여 감소되었으며, cobaltous chloride와 vitamin A를 함께 투여하였을 때는 cobaltous chloride만 투여한 군에 비하여 증가되었고, cobaltous chloride와 vitamin C 및 cobaltous chloride와 vitamin E를 각각 함께 투여하였을 때는 모두 감소되었다. 그리고 polyacrylamide-SDS-6 M urea slab gel electrophoresis 결과 hepatic microsomal cytochrome P-450 apoprotein은 band Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ, Ⅳ 4개로 나타났으며, vitamin A를 투여한 군에서는 특히 band Ⅲ와 Ⅳ가 감소되었고, vitamin C를 투여한 군에서는 band Ⅰ이 증가되고 band Ⅳ가 감소되었다. 또 vitamin E를 투여한 군에서는 특히 band Ⅳ가 감소되었다. 또한 β-naphthoflavone만 투여한 군에서는 band Ⅰ이 증가되고 band Ⅱ와 Ⅳ가 감소되었으며, β-naphthoflavone과 vitamin A, β-naphthoflavone과 vitamin C 및 β-naphthoflavone과 Vitamin E를 각각 함께 투여한 군에서는 특히 band Ⅲ가 감소되었다. 또 cobaltous chloride만 투여한 군에서는 band Ⅱ가 나타나지 않았고 band Ⅳ가 감소되었으며 cobaltous chloride와 vitamin A, cobaltous chloride와 vitamin C 및 cobaltous chloride와 vitamin E를 각각 함께 투여한 군에서는 특히 band Ⅲ와 Ⅳ가 감소되었다.