소의 혈청 알부민과 배양 시간이 소 정자의 운동성 및 첨체반응에 미치는 영향

Abstract

자연배란법을 이용한 체외수정으로 1978년 Louise Brown이 태어난 후 불임부부의 치료방법으로서 체외수정과 인공수정 기술이 발달함에 따라 이 분야의 세부적인 부분들이 더욱 깊이 연구 개발되어 왔다. 그러나 정자에 관한 연구는 아직까지도 많은 부분이 밝혀지지 않은 채 있는 실정이다. 본 연구는 다양한 배양시간 부여와 알부민의 농도 및 종류가 정자의 운동성과 첨체반응(acrosome reaction)에 미치는 영향을 관찰함으로써, 정자가 수정능력을 획득하는데 보다 좋은 조건을 부여하고 수정의 최적기를 찾아내기 위하여 소의 냉동정액을 이용하여 0, 0.3, 3, 10%로 알부민의 농도를 조절하고, 전 배양 시간을 융해 직후, 2, 6, 24시간으로 하여 알부민의 농도와 전 배양시간에 따른 소 정자의 첨체 반응 및 운동성의 변화를 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 알부민 비 첨가군에서는 배양 2시간 후에 TAR(true acrosome reaction)의 비율이 22%로 가장 높았다. 2. 알부민 0.3% 첨가군에서는 배양 6시간 후에 TAR의 비율이 26%로 가장 높았고, 알부민 3% 첨가군에서는 배양 2시간 후에 TAR의 비율이 35%로 모든 결과 중에서 가장 높았으며, 알부민 10% 첨가군에서는 배양 2시간 후에 TAR의 비율이 20%로 가장 높았다. 3. 알부민 비 첨가군에서는 시간이 지남에 따라 정자의 운동 지수가 241.2에서 3.3으로 급격히 감소하였다(P<0.05). 4. 알부민 0.3%, 3% 군에서는 6시간 배양 후까지는 운동지수가 비교적 떨어지지 않고 유지되나 24시간 배양 후에는 급격히 감소하였으나, 알부민 10%군에서는 시간에 따른 운동지수의 감소율이 완만하였고, 특히 24시간 배양 후에도 지수 117.9로 높게 유지하였다. 5. Swim up을 이용하여 정자의 회수율을 구하였는데 융해 직후에 비해 전 배양 후에는 회수율중 가장 높은 경우가 13.3%로 낮은 수준이었다. 6. TAR과 운동지수 사이에는 유의한 상관관계가 있었다(r=0.6257). 본 연구를 종합해 볼 때, 알부민은 첨체 반응에 간접적인 역할을 미치는 것으로 생각되며, 배양시간이 흐름에 따라 단순히 첨체 반응이 일어난 정자의 수는 증가하는 경향을 보이나 운동성 정자의 비율은 떨어지는 경향을 보이며, 정자의 Swim up 처리시 많은 수의 정자가 소실되므로 냉동정액을 이용하여 인공수정을 하는 경우에는 융해후 정자의 Swim up 처리없이 사용하는 것이 효과적일 것으로 생각된다. ; This study was performed to investigate the effect of albumin and preincubation on acrosome reaction and motility of sperm. Frozen bull semen was thawed and incubated in Ham’s F-10 media containing 0, 0.3, 3, 10 percent of bovine serum albumin(BSA) respectively. The analysis of sperm motility and marking of slides for observation of acrosome reaction was done in 2, 6 or 24 hour incubation. The results were as follows : 1. The incidence of true acrosome reaction(TAR) in sperms which were incubated in a albumin free medium was highest to be 22 percent in 2 hour incubation. 2. The incidence of TAR in sperms which were incubated in a medium containing 0.3 percent of BSA was highest to be 26 percent in 6 hour incubation, in a medium containing 3 percent of BSA was 35 percent in 2 hour incubation, and in a medium containing 10 percent of BSA was highest to be20 percent in 2 hour incubation. 3. In a albumin free medium, motility index was sharply decreased from 241.2 to 3.3 according to the length of incubation. 4. In a medium containing 0.3 or 3 percent of BSA motility index was sustained relatively well until 6 hour incubation, but was sharply decreased to 11.8 or 25.4 in 24 hour incubation, but in a medium containing 10 percent of BSA motility index was bluntly decreased to be 117.9 even in 24 hour incubation. 5. Sperm recovery rate from swim up preparation was as low as the highest value was at most 13.3 percent. 6. There was positive correlation between motility index and the incidence of TAR(r=0.6257). In this study, it was concluded that albumin was required for induction of acrosome reaction in indirect manner. And as the incidence of acrosome reaction itself was increased, motility rate of sperms was decreased according to the length of incubation. And sperm recovery rate from swim up preparation was so low that thawed sperms would be used without swim up preparation in case of artificial insemination.