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조혈세포 성장촉진인자 IL-3, IL-6 및 SCF가 마우스 거핵구 집락형성에 미치는 영향

Title
조혈세포 성장촉진인자 IL-3, IL-6 및 SCF가 마우스 거핵구 집락형성에 미치는 영향
Authors
이은희
Issue Date
1994
Department/Major
대학원 의학과
Publisher
이화여자대학교 대학원
Degree
Doctor
Abstract
조혈세포 성장촉진 인자중 interleukin-3(이하 IL-3), interleukin-6(이하 IL-6), stem cell factor(이하 SCF)는 거핵구 집락(megakaryocytic colony) 형성에 관여하는 것으로 알려져 왔다. 본 연구에서는 IL-3, IL-6 및 SCF가 단독으로 거핵구 집락형성에 미치는 영향과 두가지 cytokines 병합첨가시의 상승효과를 비교연구하고자 다음과 같은 방법으로 실험을 실시하였다. 즉, recombinant murine IL-3, IL-6 및 SCF를 마우스 골수세포 배양시 단독으로 첨가한 제I군, 제II군 및 제III군과 IL-3와 IL-6, SCF와 IL-3 및 SCF와 IL-6의 조합으로 두가지 cytokines를 병합첨가한 제IV군, 제V군 및 제VI군의 여섯개 실험군으로 나누어 5% CO_2배양기에 10일간 배양하였다. 배양시작일을 제1일로하여 배양 5일, 7일 및 10일째 acetylcholinesterase 염색후 거핵구 집락수와 총집락수를 산정하였다. 또한 cytokines의 농도변화에 따른 집락수의 변화를 관찰하고자 단독첨가군은 각각의 군별로 0 U/ml, 5 U/ml, 50 U/ml 및 100 U/ml의 농도로 첨가하였다. 이와같은 마우스 골수세포 배양실험을 통하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 단독첨가군의 농도에 따른 총집락수의 변하는 제I군에서만 100 U/ml까지 유의하게 농도에 비례하여 증가하였으며 (p<0.01), 거핵구 집락수는 100U/ml까지 제I군과 제II군의 두군에서 농도에 비례하여 유의하게 증가하였다.(p<0.01) 2. 병합첨가군의 농도에 따른 총집락수의 변화는 제IV, V 및 VI군 모두에서 의미있는 증가를 보였고 (p<0.05), 제V군에서 가장 현저한 총집락수의 증가를 나타냈다. 거핵구 집락수 역시 3군 모두에서 농도에 따른 유의한 증가를 보였고 (p<0.05) 제IV군은 거핵구 집락형성에 보다 특이적으로 작용함을 시사하였다. 3. 배양일수에 따른 총집락수 및 거핵구 집락수의 변화는 단독 첨가군 세군과 병합 첨가군 세군 모두에서 배양 10일째까지 배양일수에 비례하여 증가하였다. 4. 총집락수 및 거핵구 집락수는 세군의 병합첨가군 모두에서 각각의 단독첨가군에 비해 유의하게 증가하여 상승효과를 보였다(p<0.05). 이상의 결과를 종합하여 보면 IL-3가 조혈세포 집락형성에 한정되어 있지않고 광범위하게 여러 세포주에 작용하며 그 효과는 IL-6나 SCF보다 월등하였다. 또한 두가지 cytokin을 병합으로 첨가할 때 총집락수 및 거핵구 집락수 형성에 상승효과 (synergistic effect)를 보였으며 IL-3와 IL-6 병합첨가는 거핵구 집락형성에 가장 현저한 상승작용이 있음이 확인되었다.;Interleukin-3(IL-3), interleukin-6(IL-6) and stem cell factor (SCF) have been shown to involve megakaryocytic colony formation in vitro. To assess the effects of each cytokine alone effects and the synergistic effects of two cytokines on megakaryocytic colony formation, mouse bone marrow cells were cultured in 6 different groups of which 3 groups(group I(IL-3), II(IL-6) and III(SCF)) were one cytokine alone addition groups and another 3 groups (group IV(IL-3 and IL-6), V(SCF and IL-3) and VI(SCF and IL-6) were two cytokines addition groups. The results were obtained as follows; 1. When one cytokine alone was added in culture media, the number of total colonies was increased in linear relationship with the concentration of a cytokine u to 100 U/ml in group I, and the number of megakaryocytic colonies was also linearly increased according to the concentration up to 100 U/ml in group I and group III. When two cytokines were added in combination, both the numbers of total and megakaryocytic The results were obtained as follows; 2. colonies were increased linear relationship with the concentration of cytokine up to 100 U/ml in all three groups, the total colony number of group VI was higher than group IV, but the megakarycoytic colony number of group IV was much higher than group VI. 3. All 6 groups were shown increased linear relationship with the duration of culture up to 10th day. 4. The numbers of total and megakaryocytic colonies were increased significantly in the combined groups(group IV, V and VI) compared with one cytokine alone groups(group I, II and III) (p<0.05). In conclusion, IL-3 stimulated the proliferation of multiple mouse hematopoletic cell leanages and its influence on hematopoletic colony formation was much stronger than IL-6 or SCF. And there were synergistic effects on total and megakaryocytic colony formation when two cytokines were added in culture media. Among these combination of two cytokines, IL-3 in combination with SCF induced the highest increase in the number of total and megakaryocytic colonies, IL-3 in combination with IL-6 was shown a specific stimulating effect on the megakaryocytic colony formation.
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