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만성간질환에서 Hering관의 형태학적 변화에 대한 면역조직학적 및 전자현미경적 연구

Title
만성간질환에서 Hering관의 형태학적 변화에 대한 면역조직학적 및 전자현미경적 연구
Other Titles
The Immunohistochemical and Ultrastructural Study on the Morphologic Changes of Canal of Hering in Chronic Liver Diseases
Authors
염혜정
Issue Date
2008
Department/Major
대학원 의학과
Publisher
이화여자대학교 대학원
Degree
Doctor
Abstract
배경: 담세관 연결망은 간담관계와 담도계의 실제 연결 부위에 존재하면서 Hering관으로 불리는 간 내 담소관으로 유입되고, 이 Hering관은 담세관으로 연결된다. Hering관의 구성은 한 쪽은 간세포로 둘러싸여 있고 다른 한 쪽은 담도상피세포로 이루어져 있다. 이 연구에서는 만성간질환에 의한 Hering관의 미세구조의 변화를 살펴보고자 하였다. 방법: 2005년 9월부터 2007년 3월까지 이화여자대학교부속 목동병원에 내원한 환자를 대상으로, 5례의 정상 대조군과 13례의 만성 B형 간염군, 6례의 만성 C형 간염군, 15례의 간경변군에서 조직을 채취하여, 면역조직화학염색과 전자현미경 검색으로 형태학적 변화를 관찰하고, 중합효소연쇄반응(polymerase chain reaction, PCR)으로 양적인 변화를 확인하였다. 담즙을 통해 담세관으로 배출되는 담도당단백질(biliary glycoprotein, BGP)과 교차반응을 보이는 암배아항원(carcinoembryonic antigen, CEA)에 대한 다클론성 항 암배아항원 항체(polyclonal anti-CEA antibody)를 이용한 단일 면역조직화학염색으로 담세관을 관찰하였다. 간세포를 염색하기 위한 HepPar1과 담관상피세포를 염색하기 위한 CK7로 이중 면역조직화학염색을 시행하여, 간세포는 갈색으로 담관상피세포는 파란색으로 발색하였다. 전자현미경 검색으로 Hering관의 미세구조 변화를 관찰하였다. 간 조직을 이용한 PCR을 시행하여 BGP mRNA 발현을 확인하였다. 결과: 만성간질환에서 담세관은 수지상 변화, 내강의 확장, 구불구불하게 불규칙한 주행 등의 변화를 보였고, 내강의 면적의 평균을 비교하였을 때 만성 B형 간염에서 가장 넓었고, 정상 대조군에 비해 만성간질환군의 담세관이 의미 있게 넓게 확장되어 있었다(p<0.05). HepPar1과 CK7을 이용한 이중 면역조직화학염색으로 간세포와 담관상피세포가 인접하여 맞닿아 있는 Hering관의 존재를 확인하였다. 전자현미경으로 관찰하였을 때 Hering관을 구성하는 세포들은 변성, 재생되어 있었다. Hering관 내강이 확장되었고 내강 내 미세융모의 감소가 관찰되었는데, 이러한 변화는 정상 대조군에 비해 만성간질환군에서 의미 있는 차이를 보였다(p<0.05). PCR을 이용한 BGP mRNA 발현은 만성간질환에서 증가되어 있었지만 통계적인 의미를 가지지는 않았다. 결론: 상기한 결과는, Hering관의 병리학적 변화가 담즙 흐름을 방해함으로써, 형태학적인 변화가 간담도계의 기능적 장애와 관련될 것으로 생각되었다.;Background and aims: A network of bile canaliculi drains into the intrahepatic ductule, which is called canal of Hering, and in turn drains into the bile ductule. The canal of Hering is located in hepatobiliary junction. The canals are partially lined by hepatocytes on one aspect and by ductular cells on the other. In this study, ultrastructural changes of canal of Hering caused by chronic liver disease was investigated. Methods: We have conducted electron microscopy, immunohistochemistry and reverse transcriptase/polymerase chain reaction (RT/PCR) in five normal liver tissues and tissues from thirteen patients with chronic hepatitis B, six patients with chronic hepatitis C, and fifteen patients with liver cirrhosis. Results: Staining with carcinoembryonic antigen (CEA), cross reactive to biliary glycoprotein (BGP), revealed transition from bile canaliculi to intrahepatic ductules. The bile canaliculi transitional to canals of Hering were elongated, distended, and arborescent. The mean area of dilated bile canaliculi in chronic hepatitis B was largest, and that was larger in chronic liver disease than in normal liver (p<0.05). The expression of BGP mRNA in the tissues from chronic liver disease was increased by RT-PCR. Double immunohistochemistry with HepPar1 for hepatocyte and CK 7 for biliary epithelial cell confirmed canals of Hering. In electron microscopy, hepatocytes and ductular cells composing canals of Hering were degenerated, regenerated. The differences in luminal dilatation and severity of loss of microvilli in the lumen were observed between normal control group and the group of chronic liver diseases (p<0.05). Conclusions: The above results showed that the pathologic changes of canal of Hering resulted in the disturbance of bile flow and reflexed that morphologic changes may be related to hepatobiliary dysfunction.
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일반대학원 > 의학과 > Theses_Ph.D
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