Isolation and Identification of Constituents from the leaves of Perilla frutescens var.acuta

Abstract

꿀풀과 (Lamiaceae)에 속하는 차즈기(Perilla frutescens (L.) Britton var. acuta Kudo)는 동남아시아와 인도 고산지대가 원산지인 한해살이 식물으로, 한국, 중국, 일본에서 널리 재배된다. 차즈기는 향신료, 참기름의 주원료로 사용된다. 전통의학에서, 차즈기는 천식, 유행성감기, 알레르기, 두통, 종양, 소화불량, 불안장애에 사용되어왔다. 또한, 항산화, 항균, 항암, 항알레르기, 항염증 작용을 가지고 있다는 것을 문헌을 통하여 확인했다. 차즈기는 플라보노이드, 방향유, 안토시아닌, 트라이털펜, 페놀산, 카로티노이드 등의 생리활성 물질을 포함한다. 두개의 플라보노이드인 Luteolin-7-O-diglucuronide (3) 과 apigenin-7-O-diglucuronide (6), 하나의 페놀산인 rosmarinic acid (12) 가 차즈기 물 추출물에서 분리되었다. 이 물질들을 분리하기 위해, Diaion HP-20로 충진한 open column chromatography, normal phase column, reverse phase column을 활용한 MPLC, preparative HPLC 와 TLC를 이용했다. 물질 3, 6, 12의 구조를 결정하기 위해, 1H, 13C, DEPT-135, HSQC, HMBC, COSY, NOESY NMR과 같은 분광학적 방법과 문헌조사를 활용했다. molecular docking system을 활용하여 물질 3, 6, 12가 어떤 생리활성을 가지고 있을 지 PPARα, PPARδ, tyrosinase를 대상으로 예측해보았다. 그 결과, 세 물질은 대조군과 비교하여 더 높거나 비슷한 결합 에너지를 나타냈다. 이 결과를 활용하여 in vivo 실험이 진행될 예정이다.;Perilla frutescens (L.) Britton var. acuta Kudo (Lamiaceae) is an annual plant which is native to Southeast Asia and Indian highlands, and broadly cultivated in Korea, China, and Japan. This plant has been used as a spicy vegetable and the main source of perilla oil. In traditional medicine, P. frutescens var. acuta has been known to treat asthma, influenzas, allergies, headaches, tumors, indigestion, and anxiety, and have antioxidant, antimicrobial, anticancer, anti-allergic, and anti-inflammatory effects. This plant has been reported to contain bioactive compounds such as flavonoids, volatile oils, anthocyanins, triterpenes, phenolic acids, and carotenoids. In the present study, two flavonoids, luteolin-7-O-diglucuronide (3) and apigenin-7-O-diglucuronide (6), were isolated from the water extract of Perilla frutescens var. acuta. together with a lignan, rosmarinic acid (12). Open column chromatography packed by Diaion HP-20, MPLC equipped with normal phase column, reverse phase column, preparative HPLC, and TLC were utilized, to isolate the compounds 3, 6, and 12. The structure of compounds 3, 6, and 12 were identified by spectroscopic data analysis including 1H, 13C, DEPT-135, HSQC, HMBC, COSY, and NOESY NMR experiments. Compounds 3, 6, and 12 have been tested by in silico molecular docking system to find potential bioactivities including PPARα, PPARδ, and tyrosinase. In the docking study, compounds 3, 6, and 12 exhibited similar or stronger binding energy compared with the positive control compound.