Effects of MYC gene polymorphisms on stable warfarin doses in patients with mechanical cardiac valves

Abstract

연구 목표 본 연구는 항응고제제인 warfarin의 유지용량에 영향력이 가장 큰 유전자인 VKORC1과 연관된 VKORC1의 전사인자인 MYC의 유전적 다형성이 warfarin의 유지용량에 미치는 영향을 연구하였다. 대상 및 방법 임상실험으로는, 인공판막치환술을 시행받은 후 warfarin을 투여중인 191 명의 환자를 대상으로 의무기록을 후향적으로 검토하였고, warfarin의 유지용량은 INR 값이 2 - 3 으로 3 회 이상 반복적으로 유지되는 기간의 warfarin 평균 복용 용량으로 정의하였다. 유전자의 다형성이 warfarin의 유지용량에 미치는 영향을 평가하기 위하여 모은 혈액으로부터 10 종류의 단일염기다형성 (SNP, single nucleotide polymorphism)을 분석하였다. 분석에 포함된 유전자들은 VKORC1 (rs9934438, rs9923231), CYP2C9 (rs1057910), CYP4F2 (rs2108622), MYC (rs4645962, rs4645943, rs4645948, rs4645974), 그리고 8q24 (rs1447295, rs16901979) 이었다. 또한, HepG2 cell에서 c-MYC의 siRNA를 transfection 시킴으로써 c-MYC의 knock-down과 VKORC1의 mRNA 발현 정도의 연관성을 분석하였다. 결과 인공판막치환술을 시행받은 후 warfarin을 투여중인 191 명의 환자를 대상으로 10 종류의 단일염기다형성 유전형을 분석한 결과, VKORC1 rs9934438, rs9923231, CYP2C9 rs1057910, CYP4F2 rs2108622, MYC rs4645962 그리고 수술시행 당시의 나이가 warfarin 유지용량에 현저한 영향을 미치는 것으로 나타났다 (P<0.05). 이 외에도 8q24 (rs1447295)가 warfarin 유지용량에 대해 유의성을 보였다 (P<0.1). 한편, 다중선형회귀분석에서는 VKORC1 rs9934438, CYP2C9, CYP4F2, MYC rs4645974와 rs4645943 그리고 나이가 warfarin 유지용량에 유의적인 영향을 미치는 것으로 나타났다: Warfarin 일일 유지용량 (mg/day) = 15.024 – 9.903 ⅹ (VKORC1 rs9934438 T allele 의 수) – 2.337 ⅹ (이뇨제 사용여부) – 3.402 ⅹ (나이) – 2.469 x (CYP2C9 C allele의 수) – 3.250 ⅹ (MYC rs4645974, 0=CC, 1=CT, TT) + 1.942 x (MYC rs4645943, 0=CC, 1=CT,TT) + 3.092 x (CYP4F2, 0=GG,GA, 1=AA). HepG2 세포실험 결과로는 c-MYC의 knock-down에 의해서 VKORC1의 mRNA 발현 정도의 감소를 볼 수 있었다. 결론 임상 결과로 warfarin의 유지용량이 VKORC1의 전사인자인 MYC, MYC 연관 유전자인 8q24의 유전적 다형성과 상호 관련이 있는 것으로 나타났다. 세포실험을 통해서 MYC의 결핍 시 VKORC1의 mRNA 발현 감소를 확인하여 둘의 연관성을 파악하였다. 한국인 인공심장판막치환 환자에서 VKORC1, CYP2C9 뿐만 아니라, MYC과 8q24의 유전적 다형성 또한 warfarin 유지용량의 개체간 차이를 설명하는 예측인자임을 확인 할 수 있었다.;OBJECTIVES The aim of this study was to evaluate the effects of polymorphisms of MYC and 8q24 on the stable warfarin doses in Korean patients with prosthetic mechanical heart valves. METHODS One hundred ninety one patients with mechanical heart valve prosthesis who were taking warfarin and maintained INR of 2.0-3.0 for three consecutive times were included in the study. In order to investigate the influences of genetic polymorphisms on the inter-individual variability of daily warfarin dose requirements, 10 single nucleotide polymorphisms (SNPs) were genotyped; VKORC1 (rs9934438, rs9923231), CYP2C9 (rs1057910), CYP4F2 (rs2108622), MYC (rs4645962, rs4645943, rs4645948, rs4645974), and 8q24 (rs1447295, rs16901979). Transfection of MYC siRNA was done to evaluate the relationship between MYC knock-down and VKORC1 mRNA expression level. RESULTS Stable warfarin doses were associated with VKORC1 rs9934438, rs9923231, CYP2C9 rs1057910, CYP4F2 rs2108622, and MYC rs4645962 polymorphisms. Differences in stable warfarin doses among the genotypes showed that patients with CC genotype for VKORC1 rs9934438 required significantly higher doses (9.33 ± 1.58 mg) compared to patients with TT genotype (4.93 ± 1.51 mg). Homozygous wild type carriers of CYP2C9 rs1057910 and homozygous mutant type carriers of CY4F2 rs2108622 received higher warfarin doses. Patients with TC alleles of MYC rs4645962 required 29% dose reduction compared to patients carrying TT alleles. 9q24 rs1447295 showed borderline significance with 5.54 ± 1.92 mg of dose required in TT carriers compared to 3.60 ± 1.08 mg in TC carriers. HepG2 cell transfection with MYC siRNA resulted in decreased level of VKORC1 mRNA expression. CONCLUSION This study confirmed that stable warfarin dose is associated with MYC, the transcription factor of VKORC1, as well as VKORC1, CYP2C9, and CYP4F2 .