인간 정자와 생쥐 배아를 사용한 체외수정용 제대혈청의 생물학적 정도관리에 관한 연구

Abstract

1978년 Steptoe와 Edwards에 의하여 첫 체외수정아가 탄생한 이래, 체외수정 프로그램에 많은 연구와 발전이 있어 왔다. 그러나 체내에서 일어나는 수정과 배아 발생과정을 체외에서 성공시키기 위한 최적의 조건들에 대해서는 아직 정확하게 밝혀져 있지는 않으나, 성공적인 체외수정 결과를 위하여 최적의 배양조건을 확립하고자 하는 노력이 계속되고 있다. 그 중에서 배양액에 대한 정도관리는 체외수정 전에 필수적으로 수행되어지는 부분으로서 현재까지는 생쥐배아를 이용한 정도관리가 표준방법으로 쓰이고 있다. 그러나 이 방법은 많은 시간과 인력이 요구되므로 인간의 정자를 이용한 보다 간편한 방법이 이를 대신할 수 있는지 비교분석하기 위하여 본 연구를 시행하였다. 본 연구에서는 배양액에 첨가제(supplement)로 사용되는 인간 태아제대혈청에 대한 정도관리로서 2-세포기 생쥐배아와 인간 정자 생존지수를 검정 비교한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 2-세포기 생쥐배아의 발생능력으로 본 제대혈청의 검정결과, 총 23개의 혈청에서 345개의 2-세포기 배아는 40%에서 100%까지의 발생능력을 보였고 적합혈청이 20개, 부적합혈청이 3개로서 적합률은 86.9%였다. 2. 인간정자의 생존지수에 의해 검정된 제대혈청의 검정결과, 적합혈청이 16개, 부적합혈청이 7개로서 적합률은 69.5%였다. 3. 인간정자와 생쥐배아의 검정결과를 비교하면 생쥐배아검정으로 적합한 혈청이 인간정자 검정에서 대부분 적합하면서, 인간 정자 생존지수에 의한 검정은 판정의 기준으로서는 더욱 민감하였다(p<0.05). 인간의 정자를 이용한 정도관리는 생쥐배아를 이용한 정도관리보다 실험시간이 짧게 소요되고 경제적이며 민감도가 더 높다는 점을 볼 때 인간의 정자를 생쥐 배아에 대치하여 정도관리에 이용하여 임상에 적용함으로써 효율성을 높일 수 있을 것으로 기대된다. ; In order to obtain condition for in vitro fertilization of human ovum, it is necessary the quality control and the close surveillance of culture media. Since the current standard quality control procedure using mouse embryo is time-consuming and expensive method, more convenient and economic quality control method has been required. Therefore, in the present study, human sperm was used to assess the acceptability of cord serum used as a supplement for the culture media. The survival index of human sperm was monitered by computer and the results of the present study were compared with the standard method using mouse embryo. The results are as follows; 1. The development of mouse 2-cell embryo showed that the acceptability rate was 86.9%. 345 mouse 2-cell embryos 2-cell showed the development from 40% to 100% in 23 sera; 2- sera were acceptable and 3 sera were unacceptable. 2. In human sperm motility test, 16 sera were classified as acceptable ones and the 7 sera were unacceptable ones; the acceptability rates was 69.5%. 3. Most of the sera which were admitted as acceptable ones in mouse embryo method were also acceptable in human sperm motility lest. Moreover they are more sensitive. The conclusion of the present study is that human sperm motility test is more sensitive, convenient and economic than the mothod using mouse embryo. Therfore it is expected that human sperm can substitute the cumbersome mouse embryo method in quality control of cord sera for in vitro fertilization.