자궁 경부 상피세포에서 Hybrid Capture Assay를 이용한 고위험군 인유두종바이러스 검출의 임상적 효용성

Abstract

자궁경부암의 원인은 오랜동안 많은 논란의 대상이 되어왔는데, 남성성기의 치구(smegma), 단순포진 바이러스등이 원인인자로 여겨지다가, 최근에는 인유두종 바이러스(human papillomavirus: HPV)가 자궁경부암의 중요한 원인 인자로 받아들여지고 있다. 이를 뒷받침하는 근거로 자궁경부 전암병변 및 침윤암의 90%이상에서 인유두종 바이러스가 검출된다는 연구결과들이 있다. 따라서 최근 자궁경부암 선별검사(screening test)로 세포진 검사의 인유두종 바이러스 검출을 병행하여 실시하는 방법의 임상적 효용성 및 감염된 인유두종 바이러스의 유형에 따른 자궁경부암의 예후에 관한 많은 연구가 이루어지고 있다. 이에 본 연구에서는 자궁경부 세포진 검사시 동시에 hybrid capture assay를 이용하여 고위험 인유두종 바이러스를 검출하는 방법이, 자궁경부 병변을 선별진단하는데 있어 어떠한 임상적 효용성을 지니는지를 알아보고자 하였다. 연구대상은 1995년 8월부터 1997년 5월까지 자궁경부암 검진을 위하여 이화여자대학교 부속병원 산부인과 콜포스코피 클리닉에 내원한 환자 376예로 하였으며, 세포진 검사와 동시에 hybrid capture assay를 이용한 고위험 인유두종 바이러스 검색을 시행하여 분석한 바 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 전체 연구대상에서 고위험 인유두종 바이러스의 양성률은 41.7%(157/376)이었으며, 연령에 따른 양성율은 25세 이하에서 22.2%(8/36), 26-35세에서 49.3%(35/71), 36-45세에서 50.4%(69/137), 46세 이상에서 34.0%(45/132)로 36-45세 연령군에서 가장 양성율이 높았으나, 연령군간에 통계적인 유의한 차이는 없었다. 2. 폐경여부에 따른 고위험 인유두종 바이러스 양성율은 폐경전 여성에서 41.8%(133/318), 폐경후 여성에서 41.4%(24/58)로 두 군간에 통계적인 유의한 차이는 없었다. 3. 자궁경부의 조직학적 진단 및 세포진 검사 결과를 비교한 바, 정상 세포진 검사로 판정된 147명중 조직학적 검사상 15명은 자궁경부 상피내종양(cervical intraepithelial neoplasia: CIN)으로, 2명은 침윤성 편평상피세포암으로 진단되어, 세포진 검사의 위음성률은 11.6%(17/147)였으며, 부분적으로 세포진 검사와 조직학적 진단사이에 차이가 있었다. 4. 세포진 검사결과에 따른 고위험 인유두종 바이러스의 양성율을 보면, 정상세포진에서 4.8%(7/147), ASCUS(atypical squamous cell of undetermined significance)에서 35.1%(13/37), LGSIL에서 55.3%(47/85), HGSIL에서 76.5%(52/68), 편편상피세포암에서 97.4%(38/39)를 보여, 세포진 검사상 자궁경부병변의 등급이 높아질수록 고위험 인유두종 바이러스의 양성율이 통계적으로 유의하게 높아지는 경향을 보였다(p< 0.05). 5. 자궁경부의 조직학적 진단에 따른 고위험 인유두종 바이러스의 양성율을 보면, 정상에서 4.5%(7/154), CIN Ⅰ에서 37.5%(12/32), CIN Ⅱ에서 50.0%(19/38), CIN Ⅲ에서 74.7%(65/87), 침윤성 편평상피세포암에서 83.1%(54/65)의 양성율을 보여, 자궁경부 병변의 등급이 높아질수록 고위험 인유두종 바이러스의 양성율이 통계적으로 유의하게 높아지는 경향을 보였다(p< 0.05). 6. 세포진 검사상 정상세포진, ASCUS, LGSIL, HGSIL, 편평상피세포암으로 판정된 각각의 세포진 대상군에서, 고위험 인유두종 바이러스 검출여부와 자궁경부의 조직학적 진단결과를 비교분석한 바, 고위험 인유두종 바이러스가 양성인 군에서 음성인 군에 비하여 각각의 모든 세포진 대상군에서 자궁경부종양의 빈도가 통계적으로 유의하게 높아지는 경향을 보였다(p<0.05). 7. RLU/cutoff 비로 측정한 고위험 인유두종 바이러스 핵산(DNA)의 양을 자궁경부의 조직학적 진단에 따라 비교분석한 바, 고등급 병변으로 갈수록 인유두종 바이러스 핵산의 양이 통계적으로 유의하게 많아지는 경향을 보였다(p<0.05). 이상의 결과로 볼 때 hybrid capture assay는 자궁경부 병소에서 인유두종 바이러스 감염을 진단하는데 유용하며, 이를 자궁경부 세포진 검사와 병용하면 숨겨진 CIN의 진단에 도움이 될것으로 생각된다. 한편 비정상 세포진 결과를 가지는 환자에서 전암병변(precancerous lesion)이 침윤암으로 진행할 수 있는 고위험 환자를 예측하여 자궁경부암으로 진행되는 경우를 예방, 치료하는 지표로 hybrid capture assay 결과가 임상에서 유용하게 이용될 수 있을 것으로 본다. 또한 고위험 인유두종 바이러스 핵산의 양이 고등급 병변으로 갈수록 많아지는 결과로 보아 고위험 인유두종 바이러스가 자궁 경부암의 원인인자로서 중요한 의미를 갖는다 하겠다. 앞으로 더 많은 연구와 임상결과가 뒷받침된다면 hybrid capture assay를 이용한 인유두종 바이러스 감염 진단은, 우리나라 여성암에서 가장 많은 질환으로 알려진 자궁경부암의 발생 기전을 정립하고, 자궁경부암을 전암병변 단계에서 발견하여 침윤암의 발생빈도를 낮추는데 크게 기여하리라 생각한다.;The etiology of cervical neoplasia has been a controversial topic for many years. Although male's smegma and herpes virus have been known to be an etiologic factor in the past, recently human papilloma virus(HPV) is being considered to be the most significant factor in the development of cervical neoplasia. This is supported by many researches that have proved to have found HPV in carcinoma in situ and invasive carcinoma in more than 90% of cases. Therefore, recently there have been an increasing number of studies on the clinical efficacy of Pap smears in conjunction with a method to detect HPV as a screening test and on the prognosis of cervical neoplasia relating to the types of HPV. In this study, the clinical efficacy of detecting HPV using a hybrid capture assay while performing Pap smears in the screening of cervical lesion has been evaluated. This study included 376 patients who visited the colposcopy clinic of the Department of Obstetrics and Gynecology, Ewha Womans University Hospital from August 1, 1995 to May 31, 1997. All women simultaneously underwent Pap smears and hybrid capture assay. Women positive for either cytology or hybrid capture assay were recalled for colposcopically directed punch biopsy of all abnormal cervical areas. The results obtained were as follows; 1. Using hybrid capture assay, the detection rate of high-risk HPV of 367 women was 41.7%(157/376). The age group which showed highest detection rate was 36-45 years old group and the rate was 50.4%(69/137), but there was no statistical significance. 2. According to menstrual status, the detection rate of high-risk HPV of pre- and post-menopausal women were 41.8%(133/318) and 41.4%(24/58), and there was no statistical significance. 3. The false negative rate of Pap smear was 11.6% and showed some discrepancies between the cytologic and histologic diagnosis. 4. According to the cytologic diagnosis, the detection rates of high-risk HPV were 4.8% in normal, 35.1% in ASCUS, 55.3% in LGSIL, 76.5% in HGSIL, and 97.4% in SCC. In each cytologic group, the patients who had positive results for high-risk HPV with hybrid capture assay showed higher incidence rate of high grade lesion than those with negative results. (p<0.05) 5. According to the histologic diagnosis, the detection rates of high-risk HPV were 4.5% in normal, 37.5% in CIN I, 50.0% in CIN II, 74.7% in CIN III, and 83.1% in SCC. In each histologic group, the patients who had positive results for high-risk HPV with hybrid capture assay showed higher incidence rate of CINs and SCC than those with negative results. (p<0.05) 6. According to the comparison of histologic diagnosis between positive and negative results of hybrid capture assay according to each cytology, the high-risk HPV positive group showed higher incidence of cervical neoplasm and it was statistically significant(p<0.05). 7. By quantitative analysis using hybrid capture assay, the patients with high HPV DNA titer(RLU/cutoff ratio) had higher incidence rate of CINs and SCC than those with low HPV DNA titier. From these results, hybrid capture assay would be an ideal method for identifying HPV DNA and this method provides another information on differentiating precancerous lesions of cervix into high or low risk of progression. So, this test might have prognostic value in the management of patients with HPV related cervical intraepithelial lesions. Above results suggest that detection for high-risk human papilloma viruse types by hybrid capture assay improves the management of CIN and is very useful method when conjunction with cervical cytology. Diagnosis of HPV using the hybrid capture assay will contribute greatly in establishing the mechanism of cervical neoplasm known to be the most common tumor for women in our country and in lowering the prevalence rate of invasive cancer by detecting cervical neoplasm in precancerous stage.