Folic Acid

Abstract

In the search for an effective promoter for chondrogenic differentiation of mesenchymal stem cells among natural compounds, cholic acid, deoxycholic acid, folic acid, and salicylic acid were investigated in the pre-screening step. Based on the biomarker expression of chondrogenic, osteogenic, and adipogenic differentiation of the tonsil-derived mesenchymal stem cells (TMSCs), folic acid is selected for its significantly enhanced expression of COL II, SOX 9, and ACAN at 1 μM. Based on the above two dimensional cell culture results, TMSCs were cultured in growth medium for 3 days in the presence of folic acid or karotogenin, and further cultured for 21 days in chondrogenic induction medium by preparing cell pellets with a size of 1 mm. The biomarkers of sulfated glycosaminoglycan and proteoglycan assayed by alcian blue and safranin O staining significantly enhanced by folic acid treatments. Furthermore, chondrogenic biomarkers of COL II, SOX 9, COMP, and ACAN were significantly increased in proportion to the concentration of the folic acid over 0 (control), 10 nM, 100 nM, and 1 μM. COL X, hypertrophy factor related to the intermediate state of osteochondral factor also increased, however osteogenic biomarker of COL I α1 did not increased. Experiments showed FA was significantly more effective in chondrogenic differentiation of TMSCs than kartogenin, a well-known chondrogenic promoter which used as positive control. This study suggests that folic acid is a very excellent promoter of chondrogenic differentiation of TMSCs.;천연 화합물들 사이에서 중간엽 줄기세포의 연골 분화를 위한 효과적인 촉진제를 찾기 위해 콜산, 디옥시콜산, 엽산 및 살리실산을 사전 심사 단계에서 조사했다. 편도에서 유래된 중간엽 줄기세포 (TMSCs)의 연골 형성, 골 형성 및 지방 세포 분화에 대한 생체 지표 발현을 바탕으로, 엽산은 1 μM에서 COL II, SOX 9 및 ACAN의 상당히 증진된 발현으로 인해 선택되었다. 상기 2차원 세포 배양 결과에 기초하여, TMSCs는 1 mm 크기의 세포 펠렛을 제조함으로써 3일은 엽산이나 카토제닌을 포함한 성장 배지에서, 추가 21일 동안은 연골 분화 유도 배지에서 3차원 배양하였다. 알시안 블루와 사프라닌 O 염색에 의해 분석된 황산화 글리코사미노글리칸과 프로테오글리칸의 생체 지표는 엽산 처리로 상당히 증가되었다. 또한 연골 생체 지표인 COL II, SOX 9, COMP, 그리고 ACAN은 0 (대조군), 10 nM, 100 nM, 1 μM의 엽산 농도에 비례하여 유의하게 증가하였다. COL X, 골 연골 인자의 중간 상태와 관련된 비대화 인자도 증가하였지만, 골 형성 생체 지표인 COL I α1은 증가하지 않았다. 실험 결과, 엽산은 양성 대조군으로 사용된 잘 알려진 연골 형성 촉진제인 카토제닌보다 TMSCs의 연골 분화에 훨씬 더 효과적이었다. 이 연구는 엽산이 TMSCs의 연골 분화에 매우 우수한 촉진제임을 시사한다.