에피갈로카테킨 갈레이트의 종양미세환경 제어를 통한 난소암세포 성장 억제

Abstract

암세포는 종양 주위를 둘러싼 종양미세환경 속에서 여러 세포, 비세포 물질과 상호작용하며 악성화된다. 이는 암 발생 및 진행에 중요한 역할을 하므로 종양미세환경과 종양의 상호작용이 치료법으로 고려되어야 한다. 기존 항암제의 부작용을 줄이기 위해 세포 성장에 특이적인 분자기전에 대한 연구가 진행되고 있고 이로써 암세포에 특이적으로 작용하는 개념의 표적치료제가 발전되고 있다. 에피갈로카테킨 갈레이트 (epitallocatechin gallate, EGCG)는 녹차에 과량 함유된 폴리페놀 중 함량이 높고 생물학적 효능이 뛰어난 물질로, 대장암, 간암, 피부암, 알츠하이머와 같은 다양한 질환에 대한 억제효과가 있다. EGCG의 이러한 작용은 다양한 세포신호전달 분자를 조절함으로써 나타날 수 있다. 그러므로 암에 대한 화학적 예방이나 화학 요법에의 병용으로 활용되는 데 유리하다. 따라서 본 연구에서는 종양미세환경에서 유래하여 암세포 성장에 영향을 주는 주요 성장인자를 밝히고 EGCG가 여기에 어떤 영향을 줄 수 있는지 난소암 모델을 이용한 세포실험을 통해 확인하고자 하였다. 본 연구에서는 사람 난소암 세포 및 사람 난소 섬유아세포를 사용하였으며 섬유아세포와 암세포의 상호작용을 관찰하기 위해 섬유아세포에서 유래한 조건배양액을 암세포에 처리하였다. 섬유아세포 조건배양액과 성장인자, EGCG 등이 암세포 성장에 주는 영향은 암세포 성장률 측정, immunoblotting, HGF농도 측정을 통해 평가하였다. 결과적으로 섬유아세포의 조건배양액은 OVCAR3, OVCAR4 암세포의 MAPK경로 단백질의 활성을 유도하였고 이것의 일부는 섬유아세포에 포함된 GRO-1에 의한 효과임을 알 수 있었다. EGCG 3.5μM 이 섬유아세포 조건배양액에 전처리되면 조건배양액으로 유도된 암세포성장촉진을 억제하는 효과가 있었다. 이것은 EGCG가 IHFNO-303 섬유아세포에 작용하여 암세포 성장에 영향을 주는 인자인 HGF를 제어하는 것으로부터 기인할 수 있었다. EGCG는 HGF의 생산 및 분비와 함께 c-MET/HGF의 상호작용과 그에 의한 하위신호전달을 억제했다. 따라서 낮은 용량의 EGCG가 난소암세포의 종양미세환경에서 활성되는 기작을 표적하여 제어함으로써 항암화학요법의 치료 보조효과의 가능성이 있음을 시사한다. ;Cancer cells are malignant by interacting with various materials and cells in the tumor microenvironment surrounding the tumor. It is important to cancer development and progression. Therefore, the interaction of cancer cells with the tumor microenvironment must be considered as a cancer treatment. In order to reduce the side effects of anticancer drugs, many researchers focus on the natural extracts and its inhibition mechanism in cancer cells. And a target therapeutic agent that is specific to the molecular mechanism of cancer cells is being developed. Epigallocatechin gallate (EGCG) is major bioactive polyphenol of green tea. EGCG is effective for many diseases such as colon cancer, liver cancer, skin cancer and Alzheimer’s disease. These effects of EGCG can be manifested by modulating various cell signaling molecules. Therefore, it is advantageous to be utilized for chemoprevention against cancer or chemotherapy. This study investigated the mechanism and major factors of fibroblasts affecting the tumor microenvironment and examined the effects of EGCG on tumor microenvironment using ovarian cancer cell experiments. In the experiment, human ovarian cancer cell lines and fibroblasts derived from human ovarian tissues of ovarian tumors were used. In order to observe the interaction between fibroblasts and cancer cells, conditioned media derived from fibroblasts were treated with cancer cells. The effects of the conditioned media derived from fibroblasts, growth factors, and EGCG on ovarian cancer cell growth were evaluated by measuring cell growth rate, performing immunoblotting and measuring HGF concentration. As a result, conditioned media of fibroblasts induced the MAPK pathway proteins activation in OVCAR3 and OVCAR4 cells, and some of them were affect by GRO-1 contained in fibroblasts. Conditioned media derived from fibroblasts treated with 3.5 μM EGCG suppressed the growth increase induced by fibroblast conditioned medium in ovarian cancer cells. This effect is from that EGCG acts on IHFNO-303 fibroblasts and controls HGF, a factor that affects cancer cell growth. EGCG inhibited the production and secretion of HGF on fibroblasts as well as c-MET/HGF interaction and its downstream signal on cancer cells. In conclusion, low-dose EGCG targets and controls molecular mechanisms in the ovarian cancer cell tumor microenvironment, suggesting the possibility of therapeutic adjuvant effect in combination with chemotherapy.