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Construction and validation of a novel synthetic human scFv library

Title
Construction and validation of a novel synthetic human scFv library
Authors
김지혜
Issue Date
2015
Department/Major
대학원 생명과학과
Publisher
이화여자대학교 대학원
Degree
Master
Advisors
심현보
Abstract
Antibody phage library has been classified with four classes until now. But all four repertoires have some drawbacks. For example, immune repertoire is not suitable for make large scale library, naive repertoire have low affinity against antigen, spend too much time and effort and have many unknown and unregulated regions and lastly synthetic or semi-synthetic repertoire have limitation at transformation efficiency so, ideally designed various is able to different with virtually designed various. In this study, our purpose is make large (~10^(11() and high quality library through assembly of the 10 synthetic complementarity determining region (CDR) of single libraries such as H1, H2, odd and even for heavy chain (V_(H)) and κ1, κ2, κ3, λ1, λ2, and λ3 for light chain (V_(L)). These synthetic single libraries possessed sequences with diversity already aware and assembled into V_(H) or V_(L) before cross linked. We hope that this repertoire become better for construction of large scale antibody library and efficiency.;항체 phage library 는 지금까지 네 가지로 구분이 되어왔고 네 가지 경우 모두 몇 가지 단점을 갖는다. 예를 들어 immune repertory 는 크기가 큰 library 를 만들기에 적합하지 않고 naïve repertory 는 항원에 대한 친화도가 적고 만드는데 많은 시간과 노력이 필요하며 알지 못하거나 불규칙한 서열이 생기는 경향이 있다. 마지막으로 synthetic 또는 semi-synthetic repertory 는 형질전환 효율에 한계를 가지기 때문에 이상적으로 디자인된 다양성이 실제로 디자인된 다양성과 다를 수 있다. 이 연구의 목적은 단일 library(H 사슬의 H1, H2, H3-odd 그리고 H3-even 과 L 사슬의 λ1, λ2, λ3, κ1, κ2 그리고 κ3)의 10 개 상보성 결정부위(complemantarity-determining regions; CDR)를 조합해 10^(11( 이상의 크기와 높은 질의 library 를 만드는 것이다. 단일 library 들은 합성되었기 때문에 H 사슬과 L 사슬을 교차연결 하기 전에 각각의 서열들이 갖는 다양성을 알 수 있다. 우리는 이 repertory 가 크고 효율이 좋은 library 를 만드는데 더 좋은 방법이 되길 바란다.
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