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방사선 또는 활성산소와 60 Hz 극저주파 자계 병용 처리에 의한 Gamma H2AX의 발현과 Aneuploidy 형성에 미치는 영향
- Title
- 방사선 또는 활성산소와 60 Hz 극저주파 자계 병용 처리에 의한 Gamma H2AX의 발현과 Aneuploidy 형성에 미치는 영향
- Authors
- 윤혜은
- Issue Date
- 2014
- Department/Major
- 대학원 약학과
- Publisher
- 이화여자대학교 대학원
- Degree
- Master
- Advisors
- 이윤실
- Abstract
- 유전독성 효과는 환경적인 요소가 발암을 일으키는지 결정하기 위한 표준적인 방법으로 여겨져 왔다. 그러나 현재 Extremely Low Frequency Magnetic Fields (ELF-MFs)가 암 발생에 영향을 미치는지에 대한 연구결과는 여전히 논란으로 남아있다. 환경적인 자극 때문에 ELF-MFs가 DNA 손상에 대한 영향은 감지하기 어렵다. 그러므로 ELF-MFs가 세포손상에 영향을 미치는지에 대해 더 많은 민감한 연구방법과 체계적인 전략이 필요하다. 따라서 본 연구에서는 세포손상 정도를 알 수 있는 γ-H2AX assay와 Cell cycle을 통하여 Non-tumorigenic cell에 전리방사선 (Ionizing Radiation, IR) 또는 H2O2와 2mT ELF-MFs를 병용처리 하였을 때 ELF-MFs가 발암을 유도하는지에 관한 연구를 수행하였다. 유전독성평가방법인 γ-H2AX assay를 통하여 세포 손상 정도를 알아본 결과, human lung fibroblast WI-38과 human lung epithelial cell L132 cell을 2mT 60-Hz ELF-MFs에 6시간 노출시켰을 때 DNA double strand break (DSB)의 마커인 γ-H2AX의 발현과 foci 형성을 증가시켰지만, 1 mT ELF-MFs는 영향을 주지 않았다. 또한 IR을 단독으로 처리하였을 때보다 2 mT ELF-MFs을 병용처리 하였을 시에 γ-H2AX의 발현은 더욱 증가하였고, H2O2와 ELF-MFs 병용처리는 γ-H2AX발현에 영향을 주지 않았다. 그러므로 ELF-MFs는 DNA 손상에 영향을 미칠 수 있으며 병용처리 하는 자극제에 따라 γ-H2AX 발현에 다른 영향을 준다.
그러나 Cell cycle 실험에서, γ-H2AX assay 결과와는 달리 1mT 또는 2mT ELF-MFs (9시간 또는 12시간) 노출은 Aneuploidy의 발현을 증가시키지 않았고 IR과 H2O2를 병용처리 하였을 때 또한 Aneuploidy의 발현을 증가시키지 않았다.
;Genotoxic effect has been considered as a golden standard to determine if an environmental factor is a carcinogen, but the currently available data for extremely low frequency time-varying magnetic fields (ELF-MFs) remain controversial. As an environmental stimulus, the effect of ELF-MFs on cellular DNA may be subtle. Therefore, a more sensitive method and systematic research strategy are warranted to evaluate genotoxicity. We investigated the effect of ELF-MFs on the DNA damage response of expression of phosphorylation of H2AX(γ-H2AX), γ-H2AX foci production and aneuploidy in combination with ionizing radiation (IR), or H2O2 in non-tumorigenic human cell systems such as human lung fibroblast WI38 cells and human lung epithelial L132 cells. Exposure to 60-Hz, 2 mT ELF-MFs for 6 h produced increased γ-H2AX expression, as well as γ-H2AX foci production, a common DNA double-strand break (DSB) marker. However, 1 mT ELF-MFs exposure did not. Moreover, ELF-MFs 2 mT exposure potentiated the expression of γ-H2AX and γ-H2AX foci production when combined with IR. However, when combined with H2O2, no additional increase was shown by ELF-MFs. Therefore, ELF-MFs could affect DNA damage response and, in combination with different stimuli, provide different effects on γ-H2AX.
In aneuploidy formation, exposure to 60-Hz, 1 or 2 mT ELF-MFs for 9h or 12h did not increase the formation of aneuploidy unlike γ-H2AX expression. Also, when 2 mT ELF-MFs were combined with IR or H2O2, no additional increase of aneuploidy was found.
From the results, it is suggested that ELF-MFs could affect the DNA damage response and, in combination with different stimuli, provide different effects on γ-H2AX, however, in the case of aneuploidy formation, it did not.
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