3-Methylcholanthrene이 백서 자궁에 미치는 영향

Abstract

This study has been undertaken to examine the effect of 3-methylcholanthrene(3MC) on rat uterine growth and the mechanism of 3-methylcholanthrene in rat uterus. After diethylstilbesterol or tamoxifen or various doses of 3-methylcholanthrene or diethylstilbesterol+tamoxifen or diethylstilbesterol+3-methylcholanthrene was administered into immature female rats, uterine weight of each group was determined. Time course study of 3-methylcholanthrene on rat uterine growth was conducted. Affinity of estradiol for estrogen receptor in the rat uterus was determined via direct binding assay with ^(3)H]estradiol and the relative binding affinities of 3-methylcholanthrene and tamoxifen were estimated by competition assay. Effects of diethylstilbesterol, 3-methylcholanthrene and tamoxifen administration in vivo on rat uterine estrogen receptor level were examined. 1. Diethylstilbesterol treatment resulted in 4-fold increase in uterine weight over corn oil-treated uteri. 2. 3-methylcholanthrene alone treatment had no effect on uterine weight but diethylstilbesterol stimulatd uterine growth was inhibited by 3-methylcholanthrene. 3. While tamoxifen alone treatment showed slight increase in uterine weight, inhibited uterine growth stimulated by diethylstilbesterol when it was administrated with diethylstilbesterol. 4. Estradiol turned out to have high affinity for rat uterine estrogen receptor(kd=0.4nM). 5. The relative binding affinities of tamoxifen and 3-methylcholanthiene were 1% and 4.7% that of diethylstilbesterol for rat uterine estrogen receptor respectively. 3-methylcholanthrene was showen to have smillar affinity for rat uterine estrogen receptor with tamoxifen. 6. It was confirmed that estrogen, diethylstilbesterol and antiestrogen, tamoxifen decreased estrogen receptor from rat uterus and also, 3-methylcholanthrene decreased rat uterine estrogen receptor level when rats were treated with diethylstilbesterol, tamoxifen and 3-methylcholanthrene in vivo. Thease results indicate that 3-methylcholanthrene inhibit rat uterine growth stimulated by estrogen via estrogen receptor mediation.;본 실험에서는 백서의 자궁 성장에 미치는 3-methylcholanthrene의 영향을 관찰하고 그 작용 기전을 규명하고자 하였다. 즉, 미성숙 처녀 흰쥐에 diethylstibesterol, 3-methylcholanthrene, 안티에스트로젠인 tamoxifen, diethylstilbesterol과 여러 용량의 tamoxifen, 또는 diethylstibesterol과 여러 용량의 3-methylcholanthrene을 각가 3일 동안 매일 투여한 후 자궁 무게의 변화를 비교하였으며 diethylstibesterol, 3-methylcholanthrene, diethylstilbesterol과 3-methylcholanthrene을 각각 투여한 후 시간 경과에 따른 자궁 성장의 변화도 관찰하였다. 또한, 백서 자궁 성장에 미치는 3-methylcholanthrene의 작용 기전을 연구하고자 in vitro에서 미성숙 처녀 흰쥐로부터 얻은 자궁 세포질에 [^(3)H]estradiol을 사용하여 에스트로젠 수용체에 대한 [^(3)H]estradiol의 직접 결합 반응 실험과 3-methylcholanthrene과 tamoxifen의 경쟁적 결합 반응 실험을 시행하였으며, [^(3)H]estradiol의 치환 반응 실험을 통하여 3-methylcholanthrene과 tamoxifen 투여후의 백서 자궁의 에스트로젠 수용체 농도도 측정하였다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. Diethylstibesterol 투여시 자궁 무게는 옥수수 기름을 투여한 대조군에 비해 약 4배 증가하였다. 2. 3-methylcholanthrene 단독 튜여에 의해서는 대조군에 비해 유의적인 자궁무게의 변화를 나타내지 않았으나 diethylstibesterol과 병용 투여시 diethylstibesterol에 의한 자궁 성장을 억제시켰다. 3. Tamoxifen은 단독 투여시 자궁 성장에 부분 효능 작용을 나타냈으나 diethylstibesterol과 동시 투여시 diethylstibesterol에 의해 증가된 자궁 무게를 감소시켰다. 4. 백서의 자궁에서 estradiol은 에스트로젠 수용체에 큰 친화력을 가지는 것으로 나타났으며 해리 상수(kd)=0.4nM이었다. 5. Tamoxifen과 3-methylcholanthrene은 백서 자궁의 에스트로젠 수용체에 대해 각각 diethylstibesterol의 1%dhk 4.7%의 친화력을 가지는 것으로 나타나 3-methylcholanthrene이 안티에스트로젠인 tamoxifen와 유사한 친화력을 가지고 있음을 알 수 있었다. 6. 에스트로젠인 diethylstibesterol과 안티에스트로젠인 tamoxifen이 백서 자궁의 에스트로젠 수용체를 감소시킴이 확인되었고 또한 3-methylcholanthrene 투여 후에도 에스트로젠 수용체 농도가 감소하였다. 이상의 결과를 종합하여 볼때 3-methylcholanthrene은 백서 자궁에서 에스트로젠에 의한 자궁 성장을 억제하는 안티에스트로젠 작용을 하며, 그러한 3-methylcholanthrene의 작용은 에스트로젠 수용체를 매개하여 이루어지는 것으로 사료된다.