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Sterol로부터 17-ketosteroids로의 미생물학적 전환에 관한 연구

Title
Sterol로부터 17-ketosteroids로의 미생물학적 전환에 관한 연구
Other Titles
Studies on the Microbiological Coversion of Sterol to 17-ketosteroids
Authors
崔仁華
Issue Date
1988
Department/Major
대학원 약학과
Keywords
Sterol미생물학17-ketosteroids
Publisher
이화여자대학교 대학원
Degree
Master
Advisors
이강만
Abstract
스테롤로 부터 17-Ketosteroids로의 전환 능력을 지닌 것으로 알려진 Brevibacterium lipoiyticum IAM 1398을 실험대상으로 하여 변이를 통해 우수균주를 선별하고 선별균주에 대한 발효조건의 검토 및 고정화 세포에 의한 1, 4-Androstadiene-3, 17-dione (ADD) 생성력을 조사하였다. 1. UV 및 N-Methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(NTG)을 사용한 변이를 통해 27%의 전환 능력을 가진 균주로 부터 60%이상의 활성을 나타내는 우수균주를 선별하였다. 2. 선별한 균주에 대한 최적 pH, 최적 온도를 조사하고 탄소원, 질소원을 변경하거나 식물성기름, 아미노산, 핵산 또는 계면활성제를 첨가하여 발효조건을 변화시켰을 때 ADD생성력에 미치는 영향을 검토한 결과, 탄소원으로 Fructose, Glucose 또는 Maltose를 1% 농도로 사용하는 질소원으로는 Yeast Extract(0.5 %), Soytone(0.2 %) 또는 Peptone(0.5%)을 사용하였을 때 ADD생성이 현저하게 높았다. 배지의 pH는 6.5 가 최적이었으며, 배양 온도는 30℃가 효과적이었다. Cholesterol의 분산매로는 Tween 80(0.05%)을 사용하였을 때 ADD생성을 가장 향상시켰으며, 핵 분해효소 저해제인 α, α'-Dipyridyl을 1 mM농도로 가하고 60-72 시간 발효시켰을 때 ADD 생성량이 최대치를 보였다. 3. Carrageenan, Agar, Alginate 또는 Polyacrylamide를 사용하여 고정화한 세포를 이용하여 ADD 생성력을 검토한 결과 Carrageenan 또는 Agar를 담체로 사용한 경우 비교적 높은 활성을 보였고, 2회 이상 반복 사용에도 활성을 나타내었다.;Microbiological conversion of sterols to 17-ketosteroids has been recognized as a source for commercial preparation of steroidal drugs. In order to develop the bacterial strain and process with Brevibacterium lipoiyticum IAM 1398 capable of converting cholesterol to 1,4-Androstadiene-3,17-dione(ADD) by about 27% yield, we studied on mutation, fermentation condition of the selected strain and whole cell immobilization. The results were as follows. 1. By random mutation using UV and NTG as a mutagen, we selected a mutant to convert cholesterol to ADD with higher than 60% yield. 2. Setter production of ADD was manifested in the case of using maltose, glucose or fructose as carbon source, and yeast extract, soytone or peptone as nitrogen source. 3. Addition of Tween 80 (0.05%) as a surfactant was beneficial to increase the productivity. 4. The optimal pH was 6.5 and optimal curture temperature was 30℃. 5. Whole cell immobilization was carried out by using carrageenan, agar, alginate and acrylamide. The activity of conversion was tested for immobilized cells. In the case of carrageenan and agar. immobilized cells were active for at least two cycles of fermentation.
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일반대학원 > 생명·약학부 > Theses_Master
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