요로감염균에 대한 요정량배양에 있어 flooding technique과 실온배양에 관한 실험적 연구

Abstract

요로감염은 가장 흔한 질병중의 하나이대 감염을 일으킨 균을 정량배양하는 것이 요로감염의 진단과 치료에 가장 중요하다. 이에 본 저자는 일반 검사실에서 쓰이는 혈액한천 평판배지와 Mac Conkey·한천 평판배지에 flooding technique으로 접종하여 실시한 요정량배양과 일반적인 요정량배양법(standard loop inoculation method)을 비교하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 요검체 500예중 107예(21.4%)가 의의있는 세균뇨를 나타내었다. 2. 요검체 500예중 flooding technique에 의하여 세균집락이 하나라도 배양된 경우는 165예(33.0%)이었고, 일반적인 요정량배양법에 의하여 배양된 경우는 158예(31.6%)이었다. 3. flooding technique에 의한 배양에서만 자란 7예는 모두 10^(3)/ml이하의 세균집락수를 나타내었다. 4. 10^(3)/ml이상의 세균집락수를 보인 158예의 세균집락수를 비교한 결과 flooding technique과 일반적인 요정량배양법은 100% 일치하였다. 5 . 일반적인 요정량배양법에 의하여 의의있는 세균뇨를 보인 경우의 원인균증 가장 많은 것은 66예(61.4%)에서 동정된 Escherichiacoli이었으며 이외에 많이 분리된 균종의 순서는 Klebsiella, Enterobacter, Staphylococcus aureus, Pseudomonas, Enterococcus, Proteus 등 이었다. 요검체로부터 흔히 동정되는 Escherichia coli , Klebsiella, Enterobacter, Pseutlomonas, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Enterococcus등의 7균종을 각각 10균주씩, 균의 수를 맞추어 균부유액을 만든 후, f1ooding technique으로 혈액한천평판배지에 접종하여 실온과 37℃에서 배양한 결과, 아래와 같은 결과를 얻었다. 1. 실온에서 배양하였을 때, 적어도 24시간은 배양하여야 세균집락수를 계산할 수 있었다. 2. 세균집락의 모양은 실온배양 30시간이 되어야 37℃에서 24시간 배양시킨 세균집락의 모양과 유사하였다. 3. 실온에서 전혀 배양이 되지 않은 세균은 한 예도 없었으며 총210예중 5예(2.4%)만이 실온배양이 37℃에서 배양한 것보다 세균집락수가 적었다. 4. 37℃에서 24시간내에 10^(5)/ml이상으로 자란 70예는 실온에서 24시간 배양했을 때 모두 10^(5)/ml이상의 세균집락수를 보여 주었다. 이상과 같은 결과를 감안하면 요검체를 통상쓰이는 혈액한천 평판배지와 MacConkey한천 평판배지에 flooding technique으로 실온이나 37℃에서 정량배양하는 것은 검사실이 갖추어져 있지 않은 군소의원에서도 임산부와 같은 고위험군, 만성 혹은 재발되는 요로감염증 환자들을 위하여 특별한 기구나 기술없이 검사할 수 있고, 특히 부란기가 갖추어진 경우는 접종 다음날 의사가 직접 평판을 관찰함으로서 세균의 집락수와 집락의 모양으로 원인균을 추측할 수 있어서 치료의 지침에 도움을 신속하게 받을 수 있다. 또한 종합병원이나 군소병원에서 검사실로 요배양을 의뢰할 때 검체를 flooding technique으로 접종하여 보내면 검체수송 도중에서 발생하는 오염을 방지하여 정확한 정량배양에 도움을 줄 수 있다고 생각된다.;The urinary tract infection is one of the most common diseases and quantitative urine culture is the only certain method for the diagnosis of the urinary tract infection. So a simple, inexpensive technique for performing quantitative urine culture by the flooding technique, which is performed on blood agar and MacConkey agar plates, is presented and compared with usual loop inoculation method. The results are as follows; 1. Among 500 urine specimens, only 107 specimens(21.4%) reveal significant bacteriuria. 2. Among 500 urine specimens, 165 specimens reveal one or more colonies by the flooding technique and 158 specimens by the loop inoculation method. 3. In the 7 specimens which grow only by the flooding technique, all of them show below 10^(3) organisms per ml. 4. ALL 158 specimens containing more than 10^(3) organisms per ml gave identical colony counts obtained from flooding technique and loop inoculation method. 5. The most common causative organism for significant bacteriuria is Escherichia coli(66/107, 61.4%), followed by Kleb-siella, Enterobacter, Staphylococcus aureus, Pseudomonas, Enterococcus and Proteus. Flooding technique of bacterial culture has been tested not only at 37℃ but also at room temperature (20℃) by the calculated bacterial suspensions which are frequently isolated from the urine specimens(Escherichia coli, Klebsiella, Enterobacter, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Enterococcus, Pseudomonas). The results are as follows; 1. Compared with loop inoculation controls at 37℃, identical results are obtained from 205 consecutive specimens among total 210 specimens at 37℃ and 20℃ by flooding technique. 2. When the bacterial suspensions are cultured at room temperature, at least 24 hours are needed for proper colony counts by flooding technique. 3. The size and morphology of the colonies, which are cultured for at least 30 hours at room temperature, are similar to those cultured for 24 hours at 37℃. 4. There is no bacteria that does not grow at room temperature. These results strongly suggest that culture either initially or totally at room temperature is a reliable method of quantitative bacterial culture. In general practice, it is scarecely practicable to refrigerate postal specimens, and in hospital when a specimen is obtained in the evening and not processed until the next morning there is unnecessary delay. This simple and reliable method of urine culture, the flooding technique on blood and MacConkey agar plate and culture at room temperature, which could be conveniently carried out by a patient or medical practitioner at the bedside would be a great advantage for preventing of the proliferation of contaminant microorganisms and for adequate quantitative urine culture. And it may be conveniently used as the screening method in surveys such as at antenatal clinics and for the patients with chronic or recurrent urinary tract infection.