Anticancer Activity of Guggulsterone in Gallbladder Cancer Cells

Abstract

배경 및 목적: 담낭암은 발병 초기에 특이증상이 없어 조기 진단이 어렵고, 진단 당시 이미 주위 장기로의 침습을 동반하는 진행된 경우가 많아서 예후가 불량하다. 근치적 수술이 불가능하거나 수술 후 재발한 환자들을 대상으로 다양한 항암화학요법이 시도되어 왔으나 현재까지 표준요법으로 권장되는 요법은 없는 실정이다. Guggulsterone은 급성 골수성 백혈병, 두경부암, 전립선암, 유방암, 췌장암 등 다양한 암세포들에서 항암효과가 있는 것으로 보고되고 있는데 담낭암에서의 항암 효과에 대한 연구는 거의 없다. 본 연구에서는 guggulsterone이 담낭암 세포에서 항암효과를 보이는지 알아 보고 guggulsterone이 gemcitabine의 항암효과에 미치는 영향을 규명하고자 하였다. 방법: TGBC1 및 TGBC2 세포주에서 guggulsterone 및 gemcitabine에 의한 암세포 증식 억제 효과는 Dojindo Cell Counting Kit-8 assay를 이용하여 측정하였다. 암세포 이동 및 침윤은 24-well inserts와 Matrigel™-coated invasion chambers를 이용하여 측정하였다. 각각의 약물들이 NF-κB p65, VEGF-C 및 MMP-2의 활성도에 미치는 영향은 ELISA 방법을 이용하여 분석하였다. 결과: Guggulsterone은 TGBC1 및 TGBC2 세포주에서 암세포 증식을 용량 의존적으로 억제하였다. 또한 두 담낭암 세포주에서 세포 이동 및 침윤을 용량 의존적으로 억제하였다. Guggulsterone은 두 담낭암 세포주에서 NF-κB p65, VEGF-C 및 MMP-2의 활성도를 감소시켰다. Guggulsterone과 gemcitabine 병합요법으로 약물처리를 한 경우, gemcitabine 단독으로 투여했을 때보다 두 담낭암 세포주에서 암세포 증식이 유의하게 억제되었다. TGBC1 세포주에서 세포 이동 및 침윤은 guggulsterone과 gemcitabine 병합요법으로 약물처리를 한 경우에 gemcitabine 단독으로 투여하였을 때보다 유의하게 더 감소하였다. NF-κB p65의 활성도는 두 담낭암 세포주에서 gemcitabine 단독으로 투여했을 때보다 guggulsterone과 gemcitabine 병합요법으로 약물처리를 한 경우에 유의하게 더 감소되었다. 결론: Guggulsterone은 두 담낭암 세포주에서 NF-κB p65, VEGF-C 및 MMP-2 활성화를 저해함으로써 암세포의 증식, 이동 및 침윤을 억제하였다. 또한 guggulsgterone이 NF-κB p65억제를 통해 담낭암 세포에 대한 gemcitabine의 항암효과를 항진시키는 것을 확인하였다. 본 실험 결과는 guggulsterone이 담낭암 치료약제로서 이용될 수 있는 가능성을 보여주고 있다.;Patients with gallbladder cancer usually have a poor prognosis, and effective standard chemotherapeutic regimens have not been established. The anticancer activities of guggulsterone have been demonstrated in various cancer cells. The aims of the study were to determine the effect of guggulsterone on gallbladder cancer cells and to investigate whether treatment with guggulsterone influences the antitumor activities of gemcitabine. Human gallbladder cancer cell lines, TGBC1 and TGBC2, were used in this study. The Dojindo Cell Counting Kit-8 assay was used to determine the inhibition of cell proliferation by drugs. Cell migration and invasion were examined using 24-well inserts and Matrigel™-coated invasion chambers. The activities of NF-κB p65, VEGF-C, and MMP-2 were measured by ELISA. Guggulsterone inhibited the proliferation, migration, and invasion of gallbladder cancer cells in a dose-dependent manner. Guggulsterone significantly decreased NF-κB p65, VEGF-C, and MMP-2 activities in gallbladder cancer cells examined. Gallbladder cancer cells treated with a combination of guggulsterone and gemcitabine demonstrated significant inhibition of cell proliferation and invasion when compared to treatment with gemcitabine alone. In addition, NF-κB p65 activation decreased significantly in cells treated with a combination of guggulsterone and gemcitabine when compared to treatment with gemcitabine alone. Guggulsterone exhibits anticancer activities and enhances the antitumor activities of gemcitabine through the suppression of NF-κB p65 activation in gallbladder cancer cells. These results suggest that guggulsterone could be a potential therapeutic option for patients with gallbladder cancer.