Proteomic analysis of liver tissue from HBx transgenic mice at early stages of hepatocarcinogenesis

Abstract

전세계적으로 B형 간염바이러스의 만성감염은 간암 발생의 주요 원인중의 하나이다. 다양한 역할을 하는 바이러스 조절자인, B형 간염 바이러스 X 단백질은 바이러스 증식주기에 관여하고 간암발생과정에 중요한 역할을 한다는 것이 보고 되고 있다. 간암이 자연적으로 발생되는 HBx가 발현되는 형질전환 마우스의 간암 초기에 해당하는 간 조직에 대한 proteomics 분석법을 통해서 간암발생과정에 관련성을 가지고 있거나 간암 진단 바이오 마커로 쓰일 수 있는 단백질을 찾는 실험을 수행하였다. 간암의 초기 단계인 dysplasia와 Hepatocellular adenoma에서 HBx가 발현되는 형질전환 마우스의 간 조직 단백질을 이차원 전기영동 과정으로 분리하고 정량적인 변화가 분석되었다. Dysplasia의 경우 21개의 단백질이 HBx 형질전환 마우스에서 특이적으로 다르게 발현했고, Hepatocellular adenoma에서는 24개의 단백질을 발굴하고 이를 LC-MS/MS를 이용해 단백질을 동정하였다. 동정한 단백질 중에 특히, Raf-1 kinase inhibitory protein, glyoxalase I, fructose bisphosphatase 1, annexin A5, regucalcin, cytoplasmic malate dehydrogenase 단백질이 Dysplasia 또는 Hepatocellular adenoma 단계에서 발현 변화를 보였다. 이러한 proteomics 분석 결과는 HBx가 하나의 원인이 되는 간암 발생 기작을 규명하고 간암 진단을 위한 치료 타겟과 질병치료를 위한 새로운 약물개발에 역할을 할 것이라 기대되는 의미 있는 결과라 사료된다.;Chronic infection of Hepatitis B virus (HBV) is one of the major causes ofhepatocellular carcinoma (HCC) in the world. The hepatitis B virus X protein(HBx), a multifunctional viral regulator, participates in the viral life-cycle anddevelopment of HCC. Previously, Yu et al reported a high incidence of HCC intransgenic mice expressing HBx [19]. In this study, proteomic analysis wasperformed to mine proteins that may be involved in hepatocarcinogenesis orutilized as biomarkers for HCC. Proteins of liver tissue from transgenic miceexpressing HBx at the early stages of carcinogenesis (dysplasia andhepatocellular adenoma) were separated by 2-DE, and their alternations werequantitatively analyzed. 21 proteins are differentially expressed in HBxtransgenic mouse during dysplasia, and 24 proteins were identified duringhepatocellular adenoma (HCA) using LC-MS/MS. In particular, Raf-1 kinaseinhibitory protein, glyoxalase I, fructose bisphosphatase 1, annexin A5,regucalcin, and cytoplasmic malate dehydrogenase proteins were differentiallyexpressed during dysplasia or HCA. The proteomic analysis data provide auseful resource for clarifying the mechanism of HBx-mediated HCC, as well astherapeutic targets for HCC diagnosis and novel drug development for treatmentof the disease.