Ascorbic acid의 국소도포가 자외선을 조사한 흑색마우스의 표피 멜라닌세포에 미치는 영향

Abstract

멜라닌은 타이로신으로부터 합성되어 멜라닌소체 내에 침착되며 각질세포의 탐식에 의하여 각질세포로 이동된다. 멜라닌의 형성은 여러인자에 의하여 영향을 받으며 이들 중 자외선은 멜라닌세포내 tyrosinase의 활성화와 활동성 멜라닌세포 수의 증가로 멜라닌색소의 증가를 가져온다. 본 실험은 자외선의 반복조사로서 tyrosinase의 활성화와 활동성 멜라닌세포 수의 증가를 유도한 실험동물에 탈색소제제인 ascorbic acid (이하 AA로 약함)를 국소도포하여 AA가 표피 멜라닌세포에 미치는 영향을 관찰하였다. 성숙한 융성 흑색마우스(C57 Bl mice) 64마리의 양쪽 귀배부에 ultraviolet B(UVB)를 매일 100 mj/㎠씩 10일간 조사하였다. 조사후 무작위로 용액도포군과 연고도포군으로 나누고 용액도포군은 용액기제 도포군, 3%, 5%, 10% 도포군으로, 연고 도포군은 연고기제 도포군, 3%, 5%, 10% 도포군으로 각 8마리씩 세분 하였다. 각각의 탈색소제제를 마우스 양쪽 귀배부에 매일 2회 국소도포하였으며, DoPA염색하 광학현미경 관찰 및 전자현미경 관찰을 위해 1주, 3주, 5주 및 7주에 각 군당 2마리의 마우스 귀배부를 생검하였다. 실험결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 3% 용액도포군을 제외한 다른 용액도포군에서 멜라닌세포 수가 도포 1주부터 5주까지 대조군에 비하여 감소하였으며, 7주에는 오히려 멜라닌세포 수가 증가하였다. 2. 5% 용액도포군은 5% 연고도포군에 비하여 멜라닌세포 수가 감소하였다. 3. 전자현미경 소견상 10% 용액도포군과 10% 연고도포군에서 도포 1주부터 7주까지 멜라닌소체의 수가 감소하였다. 이상의 결과로 AA는 일시적으로 멜라닌세포 수와 멜라닌소체 수의 감소, 멜라닌침착 양상의 변화로서 탈색효과를 나타냄을 알 수 있었다.;Melanin is synthesized from tyrosine by tyrosine. The synthesis of melanin is influenced by several factors, of which ultraviolet radiation results in increased pigmentatin by increase of tyrosinase activity and melanocyte in number. To observe the effect of depigmentation of ascorbic acid, we induced activation of melanocytes and melanin pigmentation by UVB irradiation, and then topically applied ascorbic acid. Sixty four mice irradiated UVB 100mJ/㎠/day for 10 days. After then they were divided into 8 groups in random and the topical application of ascorbic acid on each group is as follows, lotion base (control), 3% lotion, 5% lotion, 10% lotion, cream base (control), 3% cream, 5% cream, and lO% cream. After irradiation ascorbic acid topically applied twice a day on both ears of mice, respectively, for 7 weeks. Two mice in each group were sacrified by the end of the 1st, 3rd, 5th and 7th week of the application, To observe the size and number of melanosomes, electron microscopic examination was done. To estimate the number of the melanocytes, light microscopic preparation of split DOPA stain was done. The results are summerized as follows: 1. In all groups except 3% lotion group (3% magnesium ascorbic acid phosphate), the number of DOPA positive melanocytes began to decrease from 1 week but rather increased at 7 weeks. 2. In 5% lotion (5% magnesium ascorbic acid phosphate) the number of DOPA positive melanocytes was significantly decreased less than that in 5% cream (5% ascorbic acid palmitate). 3. In the election microscopic findings, the number of melanosomes and the ratio of the stage Ⅳ melanosomes markedly decreased from 1 week to 7 weeks in 10% lotion (10% magnesium ascorbic acid phosphate) and 10% cream (10% ascorbic acid palmitate) compared to lotion base and cream base, respectively. It is suggested that topical application of ascorbic acid temporarily reduced pigmentation probably due to decreased number of activated melanocytes by UVB irradiation and decreased number of melanosomes and the ratio of the stage Ⅳ melanosomes.