Moderate halophiles의 분리 및 생리적 특성

Abstract

Microorganisms generally grow in the presence of NaCl less than 1%, however, halophilic bacteria can grow at higher NaCl concentration, more than 10%. In this thesis, halophilic bacteria were isolated and their physiological and biochemical characteristics were studied. Fifty halophilic bacteria were isolated from fifteen kinds of Korean salted fish foods by cultivating in Sehgal & Gibbons medium supplemented with 10% NaCl. Of them, typical strain H6 which grow fastly at 10-20% NaCl was isolated and this strain was identified as Acinetobacter sp. by morphological and biological test. The optimum NaCl concentration and temperature for growth of moderate halophile H6 were 10% and 30˚C, respectively and in the case of KCl, optimum concentration was 1.5M. The formation of protease and amylase was highest at 15% NaCl. Other enzymes involved in metabolic pathway such as Lactate dehydrogenase, Glucokinase, Glucose-6-phosphate dehydrogenase, Alanine dehydrogenase and Isocitrate dehydrogenase were also tested and their enzyme activities were observed at 0-3M NaCl concentration. In the case of Lactate dehydrogenase, its enzyme activity was highest at 2M NaCl and 3M KCl.;일반적인 세균은 1％ 이하의 NaCl 농도하에서만 성장이 가능하나 호염성 세균은 높은 NaCl 농도에서도 성장할 수 있다. 따라서 생리적인 식염(0.9％)보다도 높은 NaCl 농도에서 성장하는 호염성 세균을 분리 동정하고 그들의 생리적 및 효소학적 특성을 조사하였다. 염장식품인 젓갈류 15종류를 10％ 식염에 현탁해서, 10％ NaCl의 Sehgal & Gibbons 배지에서 배양하여 50균주의 호염성세균을 분리하였다. 이렇게 분리된 세균들을 5％, 10％, 15％, 20% NaCl의 배지에서 성장을 조사하여 10-20％ NaCl 농도에서 잘 자라고, 빠른 성장을 나타내는 균주 H6를 선별하였다. 이 균주의 형태적, 생화학적 특성을 조사한 결과 Acinetobacter sp. 라고 추정된다. 최적 성장 NaCl 농도는 10％이며 15％, 20％ NaCl농도에서도 높은 성장을 나타내고, 최적 성장온도는 30℃였으며, NaCl대신 KCl을 첨가했을 때도 1.5M 농도에서 잘 자랐다. protease와 amylase의 생성은 15％ NaCl농도에서 배양했을 때 높게 나타났다. 세포내 대사경로에 관여하는 효소들은 Lactate dehydrogenase, Glucokinase, Glucose-6-phosphate dehydrogenase, Alanine dehydrogenase, Isocitrate dehydrogenase 활성을 조사한 결과 이 효소들은 모두 활성이 있는 것으로 나타났으며, 특히 Lactate dehydrogenase의 경우에는 2M NaCl 일 때 높은 활성을 가졌으며, KCl은 3M일 때 활성이 높게 나타났다.