Candida tropicalis에 의한 요로감염에서 Randomly Amplified Polymorphic DNA(RAPD)법을 이용한 분자역학조사 및 위험인자분석

Abstract

Candida spp.에 의한 병원내감염은 1980년대동안 급속도로 증가하기 시작하였으며 이러한 추세는 1990년대에도 계속되어 원내감염의 주요 원인균주 중에 하나가 되었다(Pfaller 1995). Candida spp. 중 Candida albicans가 캔디다혈증이나 혈행으로 급속하게 퍼지는 캔디다증의 가장 흔한 원인균이지만 C. tropicalis, C. glabrata, C. parapsilosis, C. krusei 그리고 C. lusitaniae와 같은 C. albicans외의 Candida spp.에 의한 감염이 증가되고 있다(Pfaller 1995; Pfaller 1996). 최근 본원 신경외과 중환자실 환자의 뇨검체에서 C. tropicalis균주의 분리율이 증가하였기에 감염환자에 대해 위험인자를 분석하였고, randomly amplified polymorphic DNA (RAPD)법을 통해 발생양상을 파악하여 분자역학검사로서의 유용성을 살펴보았다. 연구방법은 2001년 4월 1개월간 본원 신경외과 중환자실 환자의 뇨에서 C. tropicalis의 유행으로 의심되는 12균주와 일반 병동환자의 뇨에서 분리된 C. tropicalis 13균주 그리고 표준균주 C. albicans ATCC 90028, C. parapsilosis ATCC 90018 각각 1균주가 본 연구에 이용되었다. High Pure PCR Template Preparation Kit (Roche Molecular Biochemicals, Mannheim, Germany)로 DNA를 추출하고, UBC78 (5 -GAGCTCGTGT), CD16S (5 -CCGTCAATTCACTTTAAGTTT)의 2가지 시발체를 사용하여 RAPD를 시행하였다. C. tropicalis에 의한 요로감염환자 25명에 대해 Candida spp.에 의한 요로감염의 위험인자를 진료기록부를 통해 분석하였다. 연구결과는 다음과 같다. 1) 신경외과 중환자실의 C. tropicalis 12균주에 대해서는 모두 동일한 RAPD양상을 보였고, 일반 병동의 13균주에 대한 RAPD는 다양한 양상으로 관찰되었다. 2) C. tropicalis에 의한 감염환자 25명의 위험인자를 보면, 1가지 이상의 항균제사용 25명(100%), 침습적 수기 및 치료적 시술중에서 요도 카테터삽입 19명(76%), 수술시행 11명(44%), 기관 절제술 10명(40%), 중심정맥관삽입 5명(20%), 인공호흡기사용 4명(16%), 비위관삽입 2명 (8%), 스테로이드사용 2명(8%), 호중구감소증 1명(4%) 및 기능적 요로이상 1명(4%)으로 나타났다. 3) 신경외과 중환자실과 일반 병동의 환자를 나누어서 위험인자를 비교하여 보면 침습적 수기 및 치료적 시술중에서 수술시행, 요도카테터 삽입, 기관절개술 시행에 있어서 신경외과 중환자실 환자에서 유의하게 높았으며(P<0.05), 요카테터삽입은 14명 신경외과 중환자실 환자 모두에 해당되는 것으로 나타났다. 결론적으로 RAPD결과를 통해 본원 중환자실의 C. tropicalis에 의한 요로감염은 모두 같은 C. tropicalis균주에 의한 유행이었음을 알 수 있었다. 대상환자 25명에 대한 위험인자를 보면, 1가지 이상의 항균제사용이 모든 환자에서 관찰되었고 요도카테터삽입여부에 있어서 신경외과 중환자실환자 14명 모두에게 해당되는 것으로 나타나 C. tropicalis감염원으로 요도카테터사용이 관련이 있는 것으로 추측할 수 있다. 추후 병원내 감염관리시, 분자역학조사의 한 방법으로써 RAPD법은 매우 유용하게 이용될 수 있을 것으로 생각된다.; Recently, the isolation rate of Candida tropicalis from the urine of patients in intensive care unit of neurosurgery dept. has been increased dramatically. We investigated risk factors of them and performed randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis to investigate the epidemiologic relatedness of C. tropicalis isolates and evaluated the clinical usefulness of it as a molecular epidemiologic study. 1) The RAPD analysis showed identical pattern for 12 strains of C. tropicalis from the urine of patients in ICU and heterogeneous for 13 strains of C. tropicalis in general wards. 2) The investigation of risk factors presented antibiotic therapy with more than one agents 25 (100%), urinary catheter 19 (76%), surgery 11 (44%), tracheostomy 10 (40%), central venous line 5 (20%), ventilator 4 (16%), nasogastric tube 4 (16%), steroid therapy 2 (8%), neutropenia 1 (4%) and functional anomaly in urinary tract 1 (4%). 3) In comparison of risk factors between ICU and general wards patients, surgery, urinary catheter, tracheostomy in ICU patients were significantly higher than general wards patients(P<0.05). Urinary catheter was indwelled in all ICU patients. In conclusion, we can postulate the possibility that urinary catheter might be a source of C. tropicalis outbreak in ICU of neurosurgery dept. For infection control in hospital, the RAPD analysis is thought to be very useful test as one of the molecular epidemiologic study.