유방내 비전형 상피증식, 관내암종 및 미세침윤암종에서 p53 단백 및 ki-67에 대한 면역조직화학적 연구

Abstract

유방조영술의 도입으로 유방의 전암성 병변과 관내암종 (ductal carcinoma in situ, 이하 DCIS)및 미세침윤이 있는 관내암종 (ductal carcinoma in situ with microinvasion, 이하 DCIS-Mi)등에 대한 진단율이 높아졌다. 또한 DCIS에 대한 치료방침이 유방절제술에서 유방보존술로 점차 바뀌어 가는 추세이어서 종양의 크기와 절제연에 대한 정확한 평가와 더불어 조직학적 분류, 종양단백의 발현여부 및 종양세포의 증식능 등이 치료방법의 결정과 예후에 중요한 인자가 된다. p53 종양억제유전자의 돌연변이와 소실은 유방암에서 가장 흔히 동반되는 유전적 변화이지만 유방암의 발생과정 중 어느단계에서 p53 유전자가 관여하는지 확실하지 않다. Ki-67은 핵내 단백으로 G0 와 초기 G1 기의 세포를 제외한 모든 세포주기에 발현되며 정상 또는 종양세포의 증식능을 반영한다. 침윤성 유방암에서 세포증식능은 종양의 재발과 관련된다고 하나, 전암성 병변이나 조기유방암에서는 잘 밝혀져있지 않다. 본연구를 통하여 유방의 전암성 병변과 조기유방암에서 p53 단백의 발현을 관찰하여 유방암발생과정 중 어느 단계에서 p53 단백이 과발현되는지 밝히고 예후인자로 알려진 조직학적 분화도와의 상관관계를 보고자 하였다. 또한, Ki-67 항체를 이용하여 세포증식능의 변화를 보고, 조직학적 분화도와의 관련을 추구하고자 하였다. 전암성 병변인 비전형상피증식 (Atypical ductal hyperplasia, 이하 ADH) 15예, 관내증식 (intraducta hyperplasia, 이하 IDH) 7예와 조기 유방암인 DCIS 56예, DCIS-Mi 16예의 총 94예를 대상으로 하여 면역조직화학염색으로 p53 종양단백의 발현유무와 Ki-67 표지지수를 구하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. p53 단백은 ADH와 IDH에서 모두 음성이었고, 33.9%의 DCIS와 56.3%의 DCIS-Mi에서 양성이었다 (p=0.000). 2. Ki-67 표지지수는 IDH에서 모두 낮은 표지지수군이었고, 20%의 ADH와 57.1%의 DCIS 및 68.7%의 DCIS-Mi가 높은 군에 속하였다 (p=0.000). Ki-67 표지지수의 중앙값은 IDH 0, ADH 3.0%, DCIS 10%, DCIS-Mi 18.5%이었다 (p=0.000). 3. DCIS에서의 p53 단백 발현은 Van Nuys 제 1군에서는 모두 음성이었고, 제 2군과 제 3군은 각각 18.7%와 53.3%에서 양성이었다 (p=0.001). 4. DCIS에서의 Ki-67 표지지수는 Van Nuys 제 1군의 30%, 제 2군의 50%와 제 3군의 70%에서 높은 군에 속하였다 (p=0.022). Ki-67 표지지수의 중앙값은 제 1군 3.5%, 제 2군 9.0%, 제 3군 13.0%로 증가하는 경향을 보였다 (p>0.05). 5. DCIS-Mi에서 p53 단백의 발현은 Van Nuys 제 1군에서는 모두 음성이었고, 제 2군과 제 3군은 각각 25%와 88.9%에서 양성이었다 (p=0.004). 6. DCIS-Mi에서의 Ki-67 표지지수는 Van Nuys 제 1군의 66.7%, 제 2군의 25%와 제 3군의 88.9%에서 높은 군에 속하였다 (p>0.05). Ki-67 표지지수의 중앙값은 제 1군 10%, 제 2군 5.5%, 제3군 29%였다 (p=0.04). 이상의 연구결과를 종합하여 보면 본연구에서 유방의 전암성 병변인 IDH와 ADH에서 p53 단백이 모두 음성으로 나타났고, Van Nuys 제2군 이상의 DCIS와 DCIS-Mi에서 양성으로 나온 것은 p53 단백의 과발현이 DCIS 단계에서 일어나고 특히 높은 핵등급과 괴사와 관련되는 것을 시사하였다. DCIS보다 DCIS-Mi에서 p53 단백의 양성율이 더 높게 나와 미세침윤과 p53 단백과의 관련성을 시사하였으나 DCIS-Mi의 증례가 적어 차후 더 연구가 이루어져야 될 것으로 생각된다. Ki-67 표지지수는 IDH와 ADH, DCIS, DCIS-Mi 순으로 병변이 진행할수록 증가하였으나 Van Nuys 분류에 따른 차이는 뚜렷하지 않아 예후인자로의 유용성이 떨어질 것으로 생각되었다. ; The introduction of screening mammography has led to an increase in the number of cases of premalignant and early malignant breast lesions, such as atypical ductal hyperplasia (ADH), ductal carcinoma in situ (DCIS) and DCIS with microinvasion (DCIS-Mi). Mutation of the p53 suppressor gene is one of the most common genetic alterations in breast cancer. However, it is unclear which stage this mutation occurs during breast tumorigenesis. The antibody Ki-67 recognizes a nuclear antigen that is only present in proliferating cells. It might be expected that there is a correlation between histologic subtypes of breast lesions and proliferative rate. The aim of this study was to determine the timming of p53 mutation and the relationship between histologic subtypes of breast lesions and immunohistochemical expression of p53 and Ki-67. We investigated p53 protein and Ki-67 reactivity in 16 DCIS-Mi, 56 DCIS, 15 ADH, and 7 IDH using immunohistochemistry. The results are as follows : 1. P53 pretein expression was detected in 33.9% of DCIS and 56.3% of DCIS-Mi but in none of ADH and IDH (p=0.000). 2. Ki-67 labelling index (LI) showed high proliferative activity in 20% of ADH, 57.1% of DCIS and 68.7% of DCIS-Mi but in none of IDH (p=0.000). The median Ki-67 LI was 0 in IDH, 3.0% in ADH, 10% in DCIS and 18.5% in DCIS-Mi (p=0.000). 3. P53 protein expression of DCIS was 0 in Van Nuys group 1, 18.7% in group 2 and 53.3% in group 3 (p=0.001). 4. Ki-67 LI of DCIS showed high proliferative activity in 30% of Van Nuys group 1, 50% of group 2 and 70% of group 3 (p=0.022). The median Ki-67 LI of DCIS was 3.5% in group 1, 9% in group 2 and 13% in group 3 (p>0.05). 5. P53 protein expression of DCIS-Mi was 0 in Van Nuys group 1, 25% in group 2 and 88.9% in group 3 (p=0.004). 6. Ki-67 LI of DCIS-Mi showed high proliferative activity in 66.7% of Van Nuys group 1, 25% of group 2 and 88.9% of group 3 (p>0.05). The median Ki-67 LI of DCIS-Mi was 10% in group 1, 5.5% in group 2 and 29% in group 3 (p=0.04). In summary, p53 overexpression was confined to the DCIS and DCIS-Mi groups and Van Nuys group 2 and 3. P53 positivity was significantly higher in high grade DCIS. DCIS-Mi had a higher proportion of p53 positivity than DCIS. These results suggest that p53 mutation might occur in DCIS stage and is correlated with high nuclear grade and necrosis. P53 mutation could be associated with early invasion of DCIS. Ki-67 LI was significantly increased according to the progression of the breast lesions. However, there was no apparent difference between Van Nuys DCIS classification and Ki-67 LI. Further srudy is needed to clarify the significance of Ki-67 in DCIS and DCIS-Mi.