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Differential signaling by CD27 and CD40 in mouse B lymphocytes

Title
Differential signaling by CD27 and CD40 in mouse B lymphocytes
Authors
우소연
Issue Date
2002
Department/Major
대학원 의학과
Publisher
이화여자대학교 대학원
Degree
Doctor
Abstract
CD27 분자는 최근에 기억 B 세포의 표지 항원 중 하나로 알려졌으며, CD27은 활성화 된 T 세포의 표면과, 일부의 B 세포, 자연살세포 (NK) 세포의 표면에 분포한다. CD27은 종양괴사인자 결합수용체 (tumor necrosis factor receptor (TNFR)) family에 속하며, B 세포에 발현하는 또 다른 TNFR인 CD40와 마찬가지로 신호전달의 과정에 TRAF (TNFR-associated factor) 분자들과의 결합을 통하여 신호전달이 이루어진다. CD27과 TRAF2, TRAF3, TRAF5의 결합은 293 cell에서 보고된 바는 있지만, B 세포 내에서의 상호결합에 대해서는 아직 보고되지 않았다. B 세포 내에서의 CD27의 신호전달의 결과로 나타나는 현상들을 알아 보기 의하여, 마우스 B 세포주인 CH12.LX와 M12.4.1세포에 TRAF들과 결합할 수 있는 부분으로 알려진 CD27의 C-terminal 일부를 포함하는 hCD40-mCD27를 발현시켰다. 이 세포주의 세포막 밖으로 발현된 hCD40부분을 항 hCD40 항체나, CD40 리간드를 사용하여 자극을 전달 후 B 세포의 변화를 관찰하였다. 그 결과 CD27을 통한 신호전달의 결과로 CD11a, CD23, CD54, CD80과 같은 세포표면분자들의 발현이 증가하였고, IgM의 분비가 증가되었으며 이것은 CD40을 통한 신호전달의 결과와 거의 비슷한 양상과 정도로 나타났다. CD27은 TRAF2, TRAF3과 결합하나, CD40에 의한 TRAF2, TRAF3의 감소가 관찰되는 것과는 달리, CD27을 통한 자극 전달 후 TRAF2와 TRAF3의 양의 변화는 관찰되지 않았다. 또한 TRAF2와 TRAF3의 결합부위가 CD40에서와 달리 서로 다른 부분에 결합하며, 이러한 차이가 CD40과는 다른 신호전달의 방법이 될 것으로 생각된다. ; CD27 is recently known as a memory B cell marker and is mainly expressed in activated T cells, some B cell population and NK cells. CD27 is a member of tumor necrosis factor receptor family. Like CD40 molecule, CD27 has (P/S/T/A)X(Q/E)E motif for interacting with TNF receptor-associated factors (TRAFs), and TRAF2 and TRAF5 bindings to CD27 in 293T cells were reported. To investigate the CD27 signaling effect in B cells, human CD40 extracellular domain containing mouse CD27 cytoplamic domain construct (hCD40-mCD27) was transfected into mouse B cell line CH12.LX and M12.4.1. Through the stimulation of hCD40-mCD27 molecule via anti-human CD40 antibody or CD154 ligation, expression of CD11a, CD23, CD54, CD70 and CD80 were increased and secretion of IgM was induced, which were comparable to the effect of CD40 stimulation. TRAF2 and TRAF3 were recruited into lipid-enriched membrane raft and were bound to CD27 in M12.4.1 cells. Because TRAF2, and TRAF3 degradation was not observed in CD27 stimulation, it might contribute to prolonged B cell activation of CD27. Key Words: B lymphocyte, CD40, CD27, TRAF2, and TRAF3
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일반대학원 > 의학과 > Theses_Ph.D
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