지실(Poncirus Fructus, 枳實) 추출물이 기니 픽 위장 운동에 미치는 영향

Abstract

지실(Poncirus Fructus, 枳實)은 운향과(芸香科)에 속하는 탱자 나무의 어린 과실을 건조한 것으로 동양에서 전통적으로 위장관 질환에 대한 약제로 사용해 왔으나 아직까지 위장관 운동에 미치는 영향에 대한 의학적인 증거는 거의 없다. 본 연구는 지실 추출물이 위장관 운동에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 기니 픽의 원위부 회장 약 15 cm를 채취하여 Krebs-Henseleit (K-H) 용액이 채워진 연동함에 위치시킨 후 K-H 용액을 관류시켜 연동 수축파를 유발하여 연동 수축파의 압력, 수축 곡선하 면적과 전파 속도를 측정하였다. 항문연에서 약 10 cm의 대장을 적출하여 K-H 용액을 채운 연동함에 고정한 후 인공 배설물을 구측단에 넣고 K-H 용액을 관류시켜 인공배설물이 이동하는 대장 통과 시간을 측정하였다. 지실 열수 추출물 EAB239-W, EAB239-WE, EAB239-WW와 알코올 추출물 EAB239-70%EtOH, EAB239-95%EtOH, EAB239-95%EtOH-H, EAB239-M-H을 각각 추출물 농도(1, 3, 10, 30, 100, 300 μg/ml)를 누적하여 투여하여 변화를 비교하였다. 소장 조직 절편을 K-H 용액이 담긴 욕조에 위치시키고 EAB239-W 투여 후 전기 자극하여 수축파 압력을 측정한 뒤 atropine 또는 tetrodotoxin을 투여하여 변화를 관찰하였다. 기니 픽을 수술하여 폴리에틸렌 관을 위장 내에 삽입하고 피부 밖으로 빼내어, in vivo 상태에서 관을 통하여 EAB239-WE 또는 EAB239-WW를 투여한 후 기니 픽의 위장, 소장, 근위부와 원위부 대장의 수축파 압력 변화를 관찰하였다. 소장 연동 운동 실험에서 EAB 239-W는 소장 연동 운동 속도를 의미있게 빠르게 하였다. EAB239-95%EtOH-H와 EAB239-M-H는 소장 수축파 압력을 감소시켰고 EAB239-WW, EAB239-95%EtOH-H는 각각 수축 곡선하 면적을 감소시켰다. 대장에서는 EAB239-WE가 대장 통과 시간을 의미있게 단축시켰으며 EAB239-70%EtOH와 EAB239-95%EtOH는 지연시켰다. EAB239-W에 의해 소장 조직 절편의 수축 압력은 증가되었으나, atropine 또는 tetrodotoxin 투여 후 억제되었다. EAB239-WE는 in vivo 상태에서 기니 픽의 원위부 대장의 수축 압력을 증가시켰다. 결론적으로, 지실 추출물 중 열수 추출물 일부는 장관 운동을 촉진시키고 알코올 추출물은 억제하는 것으로 보이며, 열수 추출물의 장관 운동 촉진 효과에는 무스카린 수용체와 장관 신경이 관여하는 것으로 보인다. In vivo 상태의 기니 픽에서도 열수 추출물 EAB239-WE는 대장 촉진 효과를 나타냈다. 이 연구를 토대로 장관 운동에 영향을 미친 물질을 혼합물로 만들어 천연물 약제로 개발한다면 장관 촉진제 혹은 완화제로 기능성 장관 질환의 치료에 적용할 수 있을 것이다. 앞으로 지실 단일 성분이 위장관 운동에 미치는 효과에 대한 연구가 이루어져야 할 것이다.;The Poncirus Fructus (PF) is a dried immature fruit of Poncirus trifoliate (L.) Raf. and widely used as a traditional folk medicine in Eastern Asia. PF has been used for digestive disease, allergic, and chronic inflammatory diseases. In this study, the effects of aqueous or alcohol extracts of PF on gastrointestinal motility of guinea pig was evaluated. Distal ileum was resected then placed into a peristaltic chamber. Krebs-Henseleit (K-H) solution was pumped into the lumen to induce peristalsis. The propagation velocity, amplitude of the peristaltic contraction, and area under curve (AUC) were measured. Colon was removed and the ends of the colon were connected to the two sides in the chamber. Artificial feces was inserted and K-H solution was pumped into the lumen. The colonic transit time was measured. Each aqueous ( EAB239-W, EAB239-WE, EAB239-WW) and alcohol (EAB239-70%EtOH, EAB239-95%EtOH, EAB239-95%EtOH-H, EAB239-M-H) extract was administered to the chamber with increasing dose (1, 3, 10, 30, 100, 300 μg/ml). Gastric, ileal, proximal and distal colonic motility were also measured in conscious guinea pig under treatment EAB239-WE or EAB239-WW. In the ileum, EAB239-W accelerated the velocity of propagation (p<0.05). EAB239-95%EtOH-H and EAB239-M-H decreased the amplitude of the contraction (p<0.05). EAB239-WW and EAB239-95%EtOH-H also decreased the AUC (p<0.05). In the colon, EAB239-WE shortened the transit time but EAB239-70%EtOH and EAB239-95%EtOH delayed it significantly (p<0.05). The stimulatory effect induced by EAB239-W was attenuated by atropine and abolished by tetrodotoxin. EAB239-WE stimulated only distal colonic contraction in vivo study. Each extract of the PF showed a significant effect on intestinal motility with either stimulatory or inhibitory action. These results suggest that PF has the potential for development as an agent for various functional bowel disorders.