Bevacizumab이 배양한 소의 각막내피세포에 미치는 영향

Abstract

The upregulation of vascular endothelial growth factor (VEGF) is associated with stimulation of endothelial cell growth and increased vascular permeability. So it plays an important pathogenetic role in many ophthalmic diseases. Recently bevacizumab (Avastin??, Genentech, Inc., CA), the pharmacologic inhibition of VEGF is used for the treatment of various ophthalmic diseases. This current study was performed to evaluate the in vitro effects of bevacizumab on cultured bovine corneal endothelial cells (BCE C/D-1b). Cultured BCE C/D-1b cells were treated with 6.25 mg/mL, 3.125 mg/mL, 1.25 mg/mL, 0.625 mg/ml, and 0.3125 mg/mL of bevacizumab for 2, 6, and 24 hours. Cell viability was measured with hemocytometer and it was compared with the control groups. We observed the structural change of the cells with light microscope and transmission electron microscope. The cell viabilities of BCE C/D-1b cells treated with bevacizumab for 2 and 6 hours were not significantly different from that of untreated controls (p>0.05). But the cells treated with 6.25 mg/mL, 3.125 mg/mL, 1.25 mg/mL of bevacizumab for 24 ho24 urs showed significantly decreased cell viability compared to the controls. These groups appeared the structural changes on light microscope and transmission electron microscope. This study suggests that bevacizumab, at concentration above the normally used in clinical practice, is toxic to BCE C/D-1b cells in vitro.;혈관내피세포성장인자(vascular endothelial growth factor)의 증가는 신생혈관을 유도하고 혈관 투과성을 증가시켜 여러 안과질환의 병태생리에 중요한 역할을 한다. 최근 이 혈관내피세포성장인자를 억제하는 역할을 하는 bevacizumab (Avastin??, Genentech, Inc., CA)이 다양한 안과질환의 치료에 이용되고 있다. 이에 본 연구에서는 bevacizumab이 배양한 소의 각막내피세포(BCE C/D-1b)에 미치는 영향에 대해 알아보고자 하였다. 소의 각막내피세포주를 배양하여 6.25 mg/mL, 3.125 mg/mL, 1.25 mg/mL, 0.625 mg/ml, 0.3125 mg/mL의 bevacizumab에 각각 2시간, 6시간, 24시간 동안 노출시킨 후 혈구계를 이용하여 생존율을 분석하였고 이를 대조군과 비교하였으며 광학현미경과 투과전자현미경으로 미세구조를 관찰하였다. 배양한 BCE C/D-1b 세포에 각 농도의 bevacizumab을 2시간, 6시간 동안 각각 노출시킨 경우, 대조군과 비교하여 생존율의 차이를 보이지 않았다(p>0.05). 하지만 24시간 동안 노출시켰을 때에는 6.25 mg/mL, 3.125 mg/mL, 1.25 mg/mL의 농도에서 생존율이 각각 78.5 ± 0.5%, 77.5 ± 0.6%, 87.9 ± 1.2%로, 대조군의 생존율인 96.1 ± 0.3%에 비하여 통계적으로 유의하게 감소하였다(p<0.05). 또한 생존율의 감소를 보인 실험군은 광학현미경과 투과전자현미경 소견에서 구조적 변화를 보였다. 이상의 결과로 고농도의 bevacizumab을 BCE C/D-1b 세포에 노출시켰을 때 배양한 BCE C/D-1b 세포의 생존율이 감소되었으며 구조적 변화를 보였다.