정량 형광 측정법에 의한 백혈구의 수용체 표현 연구

Abstract

Purpose : Immaturity of immune system in neonates is believed to play a significant role in making these subjects vulnerable to a wide variety of infections. It is well known that the receptors for Fc moiety of IgG (Fc gamma receptor, FcγR) are instrumental in antibody-mediated clearance of microorganism by granulocytes and monocytes, and immune regulation in lymphocytes. Furthermore, complement receptor-3 (CR3) is also important in neutrophilic adhesion, diapedesis, and phagocytic functions. In an attempt to examine their role in neonates, we compared, by using a quantitative fluorescent technique, the expressions of FcγRs and CR3 in cord blood leukocytes with those expressed in leukocytes in samples of blood obtained from adult subjects. Methods : Samples of cord blood were obtained from 30 full-term newborn (Group Ⅰ) and blood of adult subjects, from 30 healthy volunteers (Group Ⅱ ). In both groups, we measured three Fc receptors(e.g., FcγRⅠ[CD64], FcγRⅡ[CD32], and FcγRⅢ[CD16]) and one adhesion molecule (e.g., CR3[CD11b/CD18]) on granulocytes, monocytes and lymphocytes using a whole blood method with flow cytometry and quantitative bead standards to enumerate the cell surface receptors. Results : Compared to those observed in Group Ⅱ, the proportions of FcγRⅠ+ granulocytes were significantly higher in GroupⅠ. By contrast the proportions of FcγRⅡ+ or FcγRⅢ+ granulocytes and number of FcγRⅢ were significantly lower in Group Ⅰ as compared those obtained in the other group. The proportions of FcγRⅠ+, FcγRⅡ+, and CD18+ bearing monocytes were also significantly lower in Group Ⅰ as compared to those observed in the other group. As compared to those in Group Ⅱ, the number of FcγRⅡ in lymphocytes was significantly lower in GroupⅠ. However, there was no significant difference between two groups in terms of percentage of cells bearing FcγRⅡ+ receptors. Conclusion : there were differences in the proportions of cells expressing Fc γRs and CR3 and in the number of FcγRs and CR3 in granulocytes, monocytes, and lymphocytes between cord blood and peripheral blood samples obtained from adult subjects. These may contribute to the difference in immune capability that is known to exist between neonates and adult subjects.;신생아가 성인에 비해 세균, 바이러스 등의 여러 미생물 감염에 쉽게 이환되며 더 중한 감염으로 진행되는 소견을 설명할 수 있는지 알기 위하여 탐식작용, 항체매개성 세포독성 등에 의해 감염에 대한 인체 방어에 중요한 역할을 감당하고 림프구의 항체 생산조절 기능에 관여하는 IgG 수용체인 Fcγ수용체와 CR3의 표현을 정량 형광 측정법으로 제대혈 과립구, 단구 및 림프구에서 알아보고 이를 성인에서와 비교하였고 향후 이들 세포의 기능과의 연관성을 연구하는데 기초를 삼고자 본 연구를 시행하였다. 본 연구의 대상은 특이한 병력이 없는 건강한 산모 30명의 만삭분만시 제대혈을 채취하였고 건강한 성인 30명에서 말초혈을 채취하여 대조군으로 삼았다. 제대혈과 성인의 말초혈의 백혈구 중 과립구, 단구, 림프구의 FcγRⅠ, FcγRⅡ, RCγRⅢ, 및 CR3인 CD11b, CD18분자를 표현하는 세포의 백분율과 표현한 세포에서 각각의 분자 수를 정량 형광 측정법을 이용한 유세포 분석 방법으로 분석하였다. 제대혈에서 성인의 말초혈에 비해 과립구 FcγRⅠ 표현 세포의 비율이 의미 있게 많았고, FcγRⅡ, FCγⅢ 표현 세포의 비율과 FCγⅢ의 수는 성인 말초혈에 비해 제대혈에서 감소되어 있었음을 관찰할 수 있었다. 또한 제대혈 단구의 FcγRⅠ, FcγRⅡ, 및 CD18 표현 세포율과 FcγRⅠ의 수가 성일 말초혈에 비해 적었고 제대혈 림프구는 FcγRⅡ의 표현 세포율에 차이는 없었으나 FcγRⅡ의 수가 적었다. 연구 결과 제대혈 과립구, 단구 및 림프구의 Fcγ수용체와 CR3 표현세포들의 비율과 표현 세포에서의 각 분자의 수는 각 세포에서 그 종류에 따라 성인과 비교하여 차이가 있었으며, 성인에 비해 미숙한 세포들로 구성되어 있음을 확인할 수 있었다. 이는 제대혈 백혈구의 특징을 보여주는한 지표가 될 수 있다고 생각되며, 이와 같이 표현에 차이를 보이는 수용체를 가지고 있는 제대혈 백혈구의 기능적 차이를 비교 연구하면 수용체의 표현과 기능과의 연관성을 밝힐 수 있으리라 생각된다.