B형간염표면항원 음성인 간세포암 및 만성간염 환자에서 중합효소연쇄반응으로 증명된 B형과 C형간염바이러스의 동시간염에 관한 연구

Abstract

B형간염바이러스와 C형간염바이러스는 감염 경로가 유사하므로 동일한 환자에서 동시에 감염을 일으킬 수 있으며, 따라서 이들의 만연지역에서는 상당히 높은 동시감염률이 예상된다. 이 두 바이러스가 인체내에서 상호 어떤 영향을 미치는지, 또 어떤 기전에 의해 간세포의 악성형질전환 (malignant transformation)을 유발하는지에 관해서 분자생물학적 측면에서 확실히 밝혀진 바는 없다. 단지 체외에서는 C형간염바이러스 core 단백이 B형간염바이러스의 중합효소 활성을 억제한다는 보고가 있으며, 체내에서는 이들이 서로 상대방의 증식을 방해하는데 C형간염바이러스가 B형간염바이러스를 억제하는 정도가 더 크다고 보고되고 있다. B형 및 C형간염바이러스를 동시에 가지는 환자의 경우에 B형간염바이러스의 혈중 측정치가 감소하여 일상적인 효소면역검사로는 바이러스의 존재를 규명하지 못하는 경우가 생길 수 있을 것이다. 우리나라가 원발성간암과 B형간염의 호발지역이며 C형간염 환자 역시 적지않다는 사실은 간암 발생의 위험인자에 관한 역학적 조사를 통해서 간세포의 악성 형질전환 과정에 작용하는 바이러스의 역할을 밝히는 데 기여할 수 있다는 장점이 있다. 따라서 효소면역법으로 시행하는 표면항원 검사만으로 B형간염바이러스혈증을 간과하지 않기 위해서는 보다 민감도가 우수한 추가적인 검사를 시행해야 할 것이다. 저자는 C형간염바이러스 단백에 의해 B형간염바이러스의 증식이 억제된다는 일부 학자들의 이론이 인체내에서는 어떠한지를 알아봄으로써, 우리나라와 같은 B형간염과 간세포암 호발지역에서 B형간염바이러스혈증을 정확히 진단하기 위해 바이러스성 간염의 진단에 보다 민감도가 우수한 분자생물학적 검사가 필요함을 제시하고자 하였다. 저자는 681명의 원발성간암 환자에서 B형간염바이러스와 C형간염바이러스에 관한 혈청학적 검사로 B형간염표면항원 (HBsAg)과 C형간염바이러스항체(anti- HCV), C형간염바이러스 RNA (HCV RNA) 등의 결과를 분석하였다. 이들 중에서 anti-HCV 혹은 HCV RNA 양성이면서 HBsAg 음성인 21명의 간암환자와 11명의 만성간염 환자를 대상으로 B형간염바이러스 중합효소연쇄반응(HBV PCR)을 시행하였다. 대조군으로는 HBsAg 음성이면서 anti-HCV의 HCV RNA 음성인 15명의 간세포암 환자와 30명의 만성간염 환자를 선택하여 HBV PCR을 시행하였다. 또한 B형간염바이러스 감염자 중에서 C형간염바이러스혈증 유무에 따른 바이러스 수치의 차이를 알아보기 위해 HBV PCR 양성인 45명의 간세포암 환자를 대상으로 Hybrid Capture Assay를 이용한 B형간염바이러스 정량검사를 시행하였다. 결과는 다음과 같았다. 1. 681명의 간세포암 환자에서 HBsAg 단독양성군은 490명 (72.0%), anti-HCV 단독양성군은 43명 (6.3%), HBsAg과 anti-HCV 동시감염군은 13명 (1.9%)이었다. 2. 각 환자군에서의 평균 연령은 HBsAg 단독양성군이 51세, anti-HCV 단독 양성군이 63세, 동시감염군이 62세로 HBsAg 단독양성군이 다른 두 군보다 유의하게 낮았다 (P < 0.05, by ANOVA test). 혈청 ALT치는 HBsAg 단독양성군이 58.3 ± 55.9 IU/L, anti-HCV 단독양성군이 61.8 ± 59.8 IU/L, 동시양성군이 90.7 ± 82.3 IU/L로 세 군간에 통계적으로 유의한 차이는 없었으나 동시감염군에서 ALT 수치가 다소 높은 경향이 있었다. 3. C형간염바이러스항체 혹은 C형간염바이러스혈증이 있으면서 HBsAg 음성인 간세포암 환자 21명에서 HBV PCR 양성은 6명 (28.6%)이었고 C형간염이 없는 간세포암 환자 15명중 4명 (26.6%)과 유의한 차이는 없었다. C형간염바이러스항체 혹은 C형간염바이러스혈증이 있으면서 HBsAg 음성인 만성간염 환자 11명 중에서는 8명 (72.7%)에서 HBV PCR 양성으로 C형간염이 없는 만성감염 환자 30명 중 1명 (3.4%) 보다 유의하게 높았다 (P < 0.05, by Chi-square test). 4. B형간염바이러스 PCR 양성인 간세포암 환자 45명을 대상으로 시행한 Hybrid Capture Assay에 의한 B형간염바이러스 정량검사 결과 C형간염바이러스혈증이 있는 경우는 모두 음성이었고, 없는 경우는 113.5 ± 433.0 pg/mL였다. 이상의 결과에서, 우리나라와 같은 B형간염 호발지역에서는 HBsAg 음성인 만성간염의 경우라 할지라도 C형간염바이러스 항체 혹은 HCV RNA가 양성이면 적은 수의 B형간염바이러스가 동시에 존재할 수 있으므로 반드시 HBV PCR을 시행하여 B형간염바이러스 감염 여부를 밝혀야 하겠다.;Because the transmission routes of hepatitis B (HBV) and C viruses (HCV) are quite similar, coexistence of these two viruses in the same patient is not rare, particularly in endemic areas of both viruses. Understanding the mutual relationship between HBV and HCV in dual infection is limited. The mechanism by which HBV and HCV cause malignant transformation of hepatocytes is not fully clarified in molecular level. It is reported that HCV core protein suppressed the HBV DNA polymerase activity in vitro. In vivo, although a reciprocal suppressive action between viral replication of the two viruses has been suggested, it is well known that HBV suppression by HCV is more powerful. In the patients coinfected with HBV and HCV, HBV titer is decreased and the presence of HBV cannot be detected by routine enzyme immunoassay (EIA). The fact that Korea is an endemic area of hepatitis B and hepatocellular carcinoma (HCC) can attribute to clarify the role of the viruses in malignant transformation of hepatocytes by epidemiologic study about risk factors for hepatocellular carcinoma. Hepatitis B surface antigen (HBsAg) test by EIA alone can miss the HBV viremia, so more sensitive test must be done additionally. The aim of this study was to confirm the theory that HBV replication is interfered by HCV protein in vivo and to propose the need of more sensitive molecular method to detect the viremia in HCC and HBV endemic area such as Korea. The serological profiles of HBV and HCV, hepatitis B surface antigen (HBsAg), hepatitis C virus antibody (anti-HCV) and HCV RNA were analysed in 681 patients with HCC. Sera were obtained from 21 HCC patients and 11 chronic hepatitis patients who positive for anti-HCV or HCV RNA and negative for HBsAg and tested for HBV PCR. As a control group, 15 HCC patients and 30 chronic hepatitis patients, both of whom were negative for anti-HCV, HCV RNA, and HBsAg were selected, and HBV PCR was also performed. The results were as follows: 1. Of the 681 patients with HCC, 490 (72.0%) were positive for HBsAg only, 43 (6.3%) were positive for anti-HCV only, and 13 (1.9%) had viral markers for both HBV and HCV. 2. Mead ages in each group were 51 years in HBsAg positive group, 63 in anti-HCV positive group, and 62 in coinfected group. In HBsAg positive group, the mean age was significantly lower than in other two groups (P<0.05, by ANOVA test). Serum ALT levels in each group were 58.3±55.9 IU/L, 61.8±59.8 IU/L and 90.7±82.3 IU/L respectively. No significant differences were recognized among these groups, but in coinfected group serum ALT level seemed higher. 3. In HBsAg negative HCC patients, six out of the 21 (28.6%) patients with HCV infection (positive anti-HCV or positive HCV RNA) were HBV PCR positive, while 4 out of 15 (26.6%) patients without HCV infection were HBV PCR positive. In HBsAg negative chronic hepatitis patients, HBV PCR positive rate of patients with HCV infection was 72.7% (8 out of 11), which was significantly higher than that of patients without HCV infection (3.4%, 1 out of 30) (P<0.05, by Chi-square test). 4. The HBV quantitation by Hybrid Capture Assay in 45 HCC patients who were positive for HBV PCR showed that HBV were not detected in 4 patients with HCV viremia, but in 41 patients without HCV viremia HBV titer was high (113.5±433.0pg/mL). Based on the above results, patients with chronic liver disease who are positive for anti-HCV or HCV RNA must be tested for HBV viremia by polymerase chain reaction despite negative result of HBsAg, especially in HBV endemic area such as Korea, Because HBV may coexist in low titer.