열대열 말라리아 원충 배양의 최적 조건에 대한 연구

Abstract

열대열 말라리아 원충은 배양접시 바닥에 가라앉은 적혈구위로 배지를 흘려보내는 매우 복잡한 방법을 이용하여 배양에 성공하였다. 그 후, 배양접시와 촛불병을 이용하는 매우 간단한 배양법이 개발되었다. 이 방법은 원충을 배양하는 경우 생성되는 다른 요인들을 촉진하여 원충의 성장률과 생성을 증가시켰다. 그러나 원충의 성장에 영향을 주는 많은 여러 요인들의 최적의 배양 조건에 대한 연구는 미흡하였다. 따라서, 본 연구에서는 열대열 원충의 최적 배양 조건을 찾아보고자 한다. 열대열 말라리아 원충은 5%의 적혈구 용적률로 4.0 ㎜의 배지 깊이에서 CO2 5%, O2 5%, N2 90%에서 진탕하고, 신선한 전혈에서 백혈구연층을 제거하여 분리한 적혈구에 사람의 혈청을 첨가한 배지로 배양하였을 때 가장 잘 증식하였다. 배지는 하루에 한번 교환하여 배양하였으며 그 외의 조건은 열대열 말라리아 원충 배양에 크게 관여하지 않았다. 이 연구에서 Plasmodium falciparum은 american type culture collection에서 구입한 FCR-3/FMG(FCR-3/Gambia)를 녹여서 사용하였다.;The first continuous culture of the human malaria parasite, Plasmodium falciparum in vitro was obtained by a method providing for a slow flow of medium over a thin settled layer of human erythrocytes. Soon thereafter a greatly simplified method, the petri dish-candle jar technique was developed. This method facilitated examination of the different culture parameters, allowing us to improve growth rates and parasite production. It is not optimal conditions, however, for the study of the many different factors that might affect growth of the parasites. For this purpose I developed a optimal cultivation conditions of P. falciparum. The optimum in vitro cultivation conditions of the P. falciparum are 5% Hematocrit of human erythrocytes, used erythrocytes remove the buffy coat from whole blood, 4.0 ㎜ depth of media in the cultivation dish, CO2 5%, O2 5%, N2 90% gas of the air and shaking of the cultivation dish. Other condition have not an extra ordinary effect to proliferation of P. falciparum. In this study, P. falciparum thaw the FCR-3/FM(GCR-3/Gambia) which purchases from the american type culture collection and it cultivates.