안드로겐성 물질이 성 성숙 이전 단계의 정소에서 미치는 영향 연구

Abstract

The experiments investigated whether early exposure to testosterone propionate (TP) during prepuberty alters testis development in Sprague-Dawley male rats. We performed Hershberger assay using the stimulated weanling male rat by OECD protocols, cDNA microarray, and Western blot. TP was subcutaneously injected to uncastrated Sprague-Dawley male rat of 22 days old for 10 consecutive days at doses of 0.4, 0.8 ,1.0, 1.2, 1.6 mg/kg per day. At necropsy, the following tissues were removed and weighed: combined testes, epididymides (Epi), Cowper's glands (COW), levator ani, and bulbocavernosus muscles (LABC), seminal vesicles, together with coagulating gland (SV) and ventral prostate (VP). We found that TP increased the weights of Epi, VP, SV, COW, and LABC, while testis was decreased in a dose-dependent manner. In cDNA microarray analysis of testis, there were significant reductions in the expression of cytochrome P450 11A (CYP11A), the rate-limiting enzyme of steroidogenesis. Western blot analysis showed the reduction in expressions of Insulin like growth factor-I, Insulin like growth factor-Ⅱ, estorgen receptor α (ER α), and androgen receptor (AR). Taken together these results, TP exposure before puberty in male rat may produce the delay in testis development by inhibiting the CYP11A gene expression.;본 연구에서는 안드로겐성 물질이 성 성숙 이전단계의 정소에서 미치는 영향을 조사하기 위하여 비거세 미성숙 동물을 이용한 weanling stimulated Hershberger assay와 cDNA microarray analysis 및 western blot으로 각각 관련 유전자 및 단백질의 변화를 측정하였다. Weanling stimulated Hershberger assay시 Sprague-Dawley 수컷 랫드 22일령에 안드로겐성 물질인 testosterone propionate (TP) 0.4, 0.8, 1.0, 1.2, 1.6 mg/kg/day 및 항안드로겐성 물질 (Linuron, Procymidone, DDE, Flutamide)을 투여한 후 생식장기 무게의 변화를 관찰한 결과, TP군에서는 정소무게가 용량 의존적으로 감소하였고, 항안드로겐성 물질 투여 군에서는 변화가 없었다. cDNA microarray 분석 결과에서는 TP 투여 군에서 steroidogenesis관련 인자 cytochrome P450 11A (CYP11A)발현이 감소하는 것을 확인하였다. Western blot 결과에서도 Insulin like growth factor-I, Insulin like growth factor-II의 발현감소가 확인되었고, androgen receptor (AR) 및 estrogen receptor-α (ER-α)의 발현 감소도 확인 되었다. 이상의 실험결과로부터 성 성숙 이전의 안드로겐성 물질 노출은 정소발달을 저해하며 여기에 CYP11A가 관련된다는 사실을 확인하였다.